[发明专利]一种利用多壁碳纳米管促进桫椤孢子萌发的方法

权利要求书

1.一种利用多壁碳纳米管促进桫椤孢子萌发的方法，其特征在于，包括如下步骤：

1）以桫椤孢子为外植体，进行表面灭菌，获得无菌孢子悬浮液；

2）将无菌孢子悬浮液无菌播种于孢子萌发培养基上，所述孢子萌发培养基的制备方法如下：将多壁碳纳米管无菌悬浮母液添加到高压灭菌后尚未冷却的以1/2 MS为基本培养基的固体培养基中，使基本培养基中的多壁碳纳米管的浓度为25～50 mg/L。

2.如权利要求1所述的促进桫椤孢子萌发的方法，其特征在于，所述孢子萌发培养基含有50 mg/L的多壁碳纳米管。

3.如权利要求1所述的促进桫椤孢子萌发的方法，其特征在于，孢子无菌播种方法为：在充分冷却凝固的萌发培养基中加入少量无菌水使培养基表面润滑，吸取孢子悬浮液均匀接种于培养基上，先黑暗培养 24 h，再光照培养，使孢子能够同步萌发。

4.如权利要求1所述的促进桫椤孢子萌发的方法，其特征在于，孢子的灭菌方法为：称取20 mg成熟孢子置于1.5 mL无菌离心管中，加入无菌水冲洗1-3遍，然后滴入1 mL 5%NaClO溶液，振荡混匀，灭菌5～7分钟，无菌水冲洗3～5次，最后加入1 mL无菌水，获得无菌的孢子悬浮液。

5.如权利要求1-4任一项所述的促进桫椤孢子萌发的方法，其特征在于，培养室条件为：温度25±1℃，光照强度为50～60 μmoL/(m²•s)，光周期为16/8 h，湿度为30％。