[发明专利]基于苯硼酸定向偶联抗体的免疫磁吸附剂及其制备方法有效
申请号: | 202010913502.9 | 申请日: | 2020-09-03 |
公开(公告)号: | CN112067799B | 公开(公告)日: | 2022-06-14 |
发明(设计)人: | 熊勇华;郭亮;冷远逵;黄小林;林童;李响敏 | 申请(专利权)人: | 南昌大学 |
主分类号: | G01N33/543 | 分类号: | G01N33/543;G01N21/31;G01N30/14 |
代理公司: | 北京博尔赫知识产权代理事务所(普通合伙) 16045 | 代理人: | 王灿 |
地址: | 330000 江西省*** | 国省代码: | 江西;36 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 硼酸 定向 抗体 免疫 吸附剂 及其 制备 方法 | ||
1.基于苯硼酸定向偶联抗体的免疫磁吸附剂,包括磁载体和偶联在磁载体上的抗体,其特征在于,所述抗体通过磁载体表面苯硼酸基团与抗体Fc片段糖蛋白分子中的顺式二醇结构特异性的亲和作用定向偶联在磁载体表面;
所述磁载体为包裹Fe3O4纳米颗粒的聚合物微球或二氧化硅微球;
所述纳米颗粒为Fe3O4纳米颗粒;
所述磁载体表面全部或部分为苯硼酸基团;
所述的基于苯硼酸定向偶联抗体的免疫磁吸附剂的制备方法,包括如下步骤:
1)苯硼酸化磁载体的制备:先合成油溶性磁纳米颗粒,然后对聚合物进行苯硼酸化修饰制备得到含苯硼酸基团聚合物,最后通过乳化-乳液溶剂挥发法,将含有磁纳米颗粒、聚合物、挥发性非极性溶剂作为油相,含表面活性剂的水溶液作为水相,经超声、搅拌乳化制备水包油乳液,随后将乳液滴中的非极性溶剂通过挥发或旋蒸的方式去除,得到苯硼酸化磁微球载体;
所述含苯硼酸基团聚合物为利用聚苯乙烯马来酸酐PSMA或聚马来酸酐-十八烯共聚物PMAO进行苯硼酸基团改性;
所述苯硼酸化修饰为通过酰胺键将氨基苯硼酸修饰在羧基化磁载体表面;
2)抗体的定向偶联:将抗体加入到含苯硼酸化磁载体缓冲液中室温孵育,使之定向偶联到磁载体上;而后加入过量含顺式二醇结构的物质封闭磁载体上多余的苯硼酸位点;磁分离洗涤去除多余的抗体和封闭剂,获得免疫磁吸附剂;
所述含顺式二醇结构的物质为卵清蛋白OVA。
2.根据权利要求1所述的基于苯硼酸定向偶联抗体的免疫磁吸附剂的应用,其特征在于,用于对食品样本中目标危害物质的富集和纯化。
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