[发明专利]一种手性衍生试剂柱前衍生高效液相色谱拆分R/S-N-Boc-哌啶醇的方法

说明书

本发明属于分析化学技术领域，具体公开了一种手性衍生试剂柱前衍生高效液相色谱拆分R/S‑N‑Boc‑哌啶醇的方法：先将R/S‑N‑Boc‑哌啶醇与(+)‑萘普生经过酯化反应得到(+)‑萘普生‑R/S‑N‑Boc‑哌啶醇酯；再采用高效液相色谱仪，以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，用水相和有机相作为流动相，控制(+)‑萘普生‑R/S‑N‑Boc‑哌啶醇酯样品溶液流速为0.4‑0.8mL/min，进样量为2‑10μL，检测波长为210‑260nm，柱温为20‑35℃，从而将R/S‑N‑Boc‑哌啶醇分离。本发明方法得到的色谱峰峰型和对称性好、分离度高，可以灵敏地拆分R/S‑N‑Boc‑哌啶醇。

技术领域

本发明属于分析化学技术领域，涉及一种手性衍生试剂柱前衍生高效液相色谱拆分R/S-N-Boc-哌啶醇的方法。

背景技术

S-N-Boc-哌啶醇是一个重要的药物中间体，被广泛应用于镇痛、抗精神病和抗肿瘤等药物的合成，主要用于合成抗充血性心力衰竭药卡莫瑞林和治疗套细胞淋巴瘤、慢性淋巴性白血病、淋巴浆细胞性淋巴瘤和EGFR突变型的非小细胞肺癌依鲁替尼的合成。S-N-Boc-哌啶醇作为重要中间体，它的光学纯度直接影响到合成的原料药的光学纯度。因此，对R/S-N-Boc-哌啶醇手性分离方法研究有着重要的工业价值。

目前，R/S-N-Boc-哌啶醇手性拆分方法主要是酶促法。经文献检索，CN105420307A公开了一种制备(S)-N-叔丁氧羰基-3-羟基哌啶的方法，该专利通过酶催化拆分N-叔丁氧羰基-3-哌啶酮，但未说明检测方法。CN103789368A公开了一种N-保护哌啶醇的生产方法，该专利采用酶催化N-叔丁氧羰基-3-哌啶酮和1-苄基-3-哌啶酮产生相应的哌啶醇，并对最终的产物进行了检测，其检测方法为：通过使用Chiralpak ODH柱(250×4.6mm，5μm)色谱柱，流动相为正己烷/异丙醇＝95/5；出峰时间：S型7.0min，R型7.4min；该方法响应低，未达到完全分离。并且，目前没有采用手性衍生试剂柱前衍生，反向色谱系统拆分R/S-N-Boc-哌啶醇的方法。

发明内容

本发明的目的在于解决现有R/S-N-Boc-哌啶醇的拆分方法成本高、灵敏度低以及色谱峰分离度未达到要求等问题。

为了解决上述技术问题，本发明提供了如下技术方案：一种手性衍生试剂柱前衍生高效液相色谱拆分R/S-N-Boc-哌啶醇的方法，包括以下步骤：

a、将R/S-N-Boc-哌啶醇与(+)-萘普生经过柱前衍生酯化反应得到(+)-萘普生-R/S-N-Boc-哌啶醇酯；

b、采用高效液相色谱仪，以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，用水相和有机相作为反相流动相，将(+)-萘普生-R/S-N-Boc-哌啶醇酯配制成浓度为0.2-1.0mg/mL的样品溶液，控制流速为0.4-0.8mL/min，进样量为2-10μL，检测波长为210-260nm，色谱柱柱温为20-35℃，从而将R/S-N-Boc-哌啶醇分离。

其中，上述的一种手性衍生试剂柱前衍生高效液相色谱拆分R/S-N-Boc-哌啶醇的方法，所述柱前衍生酯化反应包括以下步骤：将R/S-N-Boc-哌啶醇与(+)-萘普生溶解在草酰氯溶剂中，以吡啶作为催化剂进行酯化反应得到R/S-Boc-哌啶醇酯；所述(+)-萘普生：R/S-N-Boc-哌啶醇：吡啶的摩尔比为0.80～0.84：1.00：1.20～1.24。

其中，上述的一种手性衍生试剂柱前衍生高效液相色谱拆分R/S-N-Boc-哌啶醇的方法，步骤b中，所述有机相为甲醇。

其中，上述的一种手性衍生试剂柱前衍生高效液相色谱拆分R/S-N-Boc-哌啶醇的方法，步骤b中，所述流动相中甲醇与水的体积比为74～82：18～26。

其中，上述的一种手性衍生试剂柱前衍生高效液相色谱拆分R/S-N-Boc-哌啶醇的方法，步骤b中，所述流动相中甲醇与水的体积比为76：24。