[发明专利]蒙特瑞草莓抑制褐化提高人工快繁效率的一种新方法

权利要求书

1.蒙特瑞草莓抑制褐化提高人工快繁效率的一种新方法，其特征在于：包括以下步骤：

①获取外植体；

②将步骤①中的外植体进行清洗消毒；

③将经过步骤②消毒灭菌、剥离好的材料，接入A培养基中进行抗褐化处理，所述A培养基包括以下原料：

MS基本培养液

聚乙烯吡咯烷酮(PVP)

维生素C(VC)

活性炭(AC)

氯化钠(NaCl)

蔗糖

琼脂粉

在控制光照度、温度、光照时间的条件下进行优化培养；

④将步骤③中经过抗褐化处理的外植体接入到B培养基中进行愈伤组织诱导、丛芽发生和增殖同步培养，所述B培养基包括以下原料：

MS基本培养液

6-苄胺基嘌呤(6-BA)

萘乙酸(NAA)

2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)

蔗糖

琼脂

在控制光照度、温度、光照时间的条件下分化出不定芽丛；

⑤将愈伤组织诱导出的不定芽丛分割为4～6株一丛，转接至新鲜的B培养基中，在控制光照度、温度、光照时间的条件下获得试管苗；

⑥取步骤⑤丛芽中高3-4cm的健壮主苗接种于C培养基中，所述C培养基包括以下原料：

1/2MS基本培养液

萘乙酸(NAA)

活性炭(AC)

蔗糖

琼脂

在控制光照度、温度、光照时间的条件下获得生根苗；

⑦炼苗和移栽。

2.根据权利要求1所述的蒙特瑞草莓抑制褐化提高人工快繁效率的一种新方法，其特征在于：所述步骤①中选择生长势好、无病虫害、无畸形的健壮植株，取其第二匍匐茎带芽茎段，用手术刀切割为约2-3cm长。

3.根据权利要求1所述的蒙特瑞草莓抑制褐化提高人工快繁效率的一种新方法，其特征在于：所述步骤①中的带芽茎段先用自来水清洗表面的泥土和灰尘，再将外植体用10％洗衣粉溶液(质量比)浸泡10min并轻微震荡搅动后流水冲洗30min，置于超净工作台；50％VC溶液(质量比)浸泡3min，75％乙醇溶液(体积比)处理10～15s，再经0.1％升汞水溶液(质量比)消毒8-10min，最后无菌水冲洗5-6次，每次不低于3min。在整个消毒过程中充分摇动器皿；将消毒处理后的材料置于超净工作台上，慢慢剥离其小叶，将约0.5-1.0cm茎尖接入抗褐化培养基中。

4.根据权利要求1所述的蒙特瑞草莓抑制褐化提高人工快繁效率的一种新方法，其特征在于：所述步骤③中A培养基具体为：

MS基本培养液

5.根据权利要求1所述的蒙特瑞草莓抑制褐化提高人工快繁效率的一种新方法，其特征在于：所述步骤④、步骤⑤中B培养基具体为：

MS基本培养液

6.根据权利要求1所述的蒙特瑞草莓抑制褐化提高人工快繁效率的一种新方法，其特征在于：所述步骤中C培养基具体为：

1/2MS基本培养液

7.根据权利要求1所述的蒙特瑞草莓抑制褐化提高人工快繁效率的一种新方法，其特征在于：所述步骤③、步骤④、步骤⑤与步骤⑥中光照度控制在1500-2000lx，光照时间控制在12h/d，温度控制在22±1℃。

8.根据权利要求1所述的蒙特瑞草莓抑制褐化提高人工快繁效率的一种新方法，其特征在于：所述步骤⑦中炼苗和移栽的方法具体为：取步骤⑥中6-8cm高的生根植株置于室温下炼苗3d后，从培养基中取出幼苗，将残留培养基清洗干净，放入质量浓度0.1-0.2％的多菌灵溶液中消毒2-3min，后移栽至消毒后的沙土基质中保温保湿培养，生长30d后，即得移栽苗。