[发明专利]低含量Bt晶体蛋白的快速纯化方法

权利要求书

1.目的蛋白的纯化方法，其特征在于，包括：

S1、将待测样品进行提取处理，获得含有目的蛋白的粗提取液；

S2、采用含有铵盐的氯化铯溶液对含有目的蛋白的粗提取液进行密度梯度离心，收集蛋白层液体；

S3、将所述蛋白层液体进行电泳，收集目的蛋白条带，

其中，所述待测样品为防治韭蛆的苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis的发酵液，

所述提取处理包括：

将所述发酵液进行搅拌及静置处理，除去芽孢；

将除去芽孢的发酵液进行过滤处理，收集滤液；

将所述滤液进行超滤浓缩处理，收集截留物，并将所述截留物溶解，得到所述含有目的蛋白的粗提取液，

所述氯化铯溶液中铵盐的质量浓度为15%~30%，所述静置处理的时间为1~4 min，所述超滤浓缩处理时离心转速为1000~6000 rpm。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述防治韭蛆的苏云金芽胞杆菌为保藏号CGMCC NO.9375的苏云金芽胞杆菌。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述铵盐为硫酸铵和/或氯化铵。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，进行密度梯度离心中采用的氯化铯溶液的密度为1~2 g/cm³。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述超滤浓缩处理时离心时间10~15 min。

6.目的蛋白的检测方法，其特征在于，包括：

采用权利要求1~5中任一项所述的目的蛋白的纯化方法对待测样品进行蛋白纯化，获取目的蛋白；

对所述目的蛋白进行定性或定量检测。

7.权利要求1~5中任一项所述的目的蛋白的纯化方法或权利要求6所述的目的蛋白的检测方法在对微生物杀虫剂进行质控中的应用。