[发明专利]一种利用天然海水筛选藜麦耐盐种质的方法

权利要求书

1.一种利用天然海水筛选藜麦耐盐种质的方法，所述方法，包括以下步骤：

步骤1，种子材料收集

选择“陇藜1号、陇藜3号、陇藜4号、YL(非品种名称)”种子材料，并以胚根突破种皮至少2mm为标准计算种子发芽率的方法来判定种子活力水平，将高活力水平(标准发芽率100％)的藜麦种子作为该技术的材料；

步骤2，种子精选

种子材料收集后，于实验室内手动筛选无破损、大小一致、成熟饱满的种子，保存于-20℃冰箱内，以备试验所；

步骤3，天然海水系列浓度梯度溶液配制

天然海水取自山东省青岛市红岛地区(N36°13′7″、E120°8′9″)，将其设置一系列浓度梯度，分别为0％、20％、40％、60％、70％、80％、90％和100％，并配制成相应浓度的溶液；

步骤4，溶液理化性质测定#

对天然海水系列浓度梯度溶液进行pH值和电导率值的测定；

步骤5，种子萌发试验#

以精选后的藜麦种子为材料，天然海水系列浓度梯度溶液为萌发介质，测定不同藜麦种子萌发过程耐盐性；#

步骤6，种子萌发特性与耐盐性分析

以胚根突破种皮至少2mm为标准判定种子萌发，统计萌发种子数，并计算种子萌发特性相关指标与耐盐相关指标；

步骤7，适宜筛选耐盐种质的天然海水浓度确定

根据不同藜麦种子在天然海水胁迫下萌发特性相关指标与耐盐相关指标的变化，结合统计学分析，确定藜麦种子萌发的天然海水适宜浓度条件；

步骤8，耐盐材料筛选与确定

通过比较天然海水胁迫下不同藜麦种子耐盐性差异，筛选确定藜麦耐盐材料。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，步骤1，种子材料收集

该环节需要收集不同的藜麦种子材料。选用初始活力水平高的种子作为试验样品，比较其在天然海水胁迫下萌发特性与耐盐指标的变化，以确定藜麦耐盐种质筛选的天然海水适宜浓度和耐盐材料。

3.根据权利要求1所述的方法，其中，步骤3，天然海水系列浓度梯度溶液配制

天然海水胁迫浓度是影响种子萌发特性和耐盐指标变化的重要因素。

4.根据权利要求1所述的方法，其中，步骤4，溶液理化性质测定

不同浓度天然海水溶液理化性质这一基础数据对藜麦耐盐种质筛选研究非常重要。

5.根据权利要求1所述的方法，步骤如下：

步骤1，种子材料收集

为确保藜麦耐盐种质筛选研究与应用的实用性，以胚根突破种皮至少2mm为标准计算发芽率的方法来判定种子活力水平，选用发芽率100％的藜麦种子作为供试材料；

步骤2，种子精选

为保证研究结果的精确性，排除由于种子质量不均匀造成的误差，本发明精选无破损、大小一致、成熟饱满的种子进行试验；

步骤3，天然海水系列浓度梯度溶液配制

按照0％、20％、40％、60％、70％、80％、90％和100％的系列浓度梯度，分别计算出配制各浓度溶液所对应的天然海水及蒸馏水的体积。用量筒量取对应体积的天然海水和蒸馏水，混合均匀，配制成不同浓度溶液；

步骤4，溶液理化性质测定

分别用pH计和电导率仪测定上述各浓度溶液的pH值和电导率值。将电极清洗并用滤纸吸干，插入到待测溶液中，待pH计或电导率仪显数稳定时，读数并记录。测定电导率时，若读数超过电导率仪的最大测量量程，需将溶液稀释一定倍数后，再次重新测定；

步骤5，种子萌发试验

精选无破损、大小一致、成熟饱满的藜麦种子50粒，将其摆放入盛有3层滤纸的110mm×110mm有盖培养皿中，滤纸分别用10mL各浓度天然海水润湿，蒸馏水润湿的作对照。每个处理3次重复。将培养皿置于光照培养箱(GXZ-380B-LED)中在25℃恒温黑暗条件下培养，每12h观察种子萌发情况，以胚根突破种皮至少2mm为标准判定种子萌发，统计萌发种子数，直至萌发7d；

步骤6，种子萌发特性与耐盐性分析

按照公式分别计算藜麦种子的平均发芽时间(MGT)、发芽势(GE)、发芽率(GP)、发芽指数(GI)、耐盐指数(STI)、相对盐害率(RSDR)；

MGT(days)＝Σnt/Σn，n为时间t新萌发种子数，t为从种子摆盘到计数时的天数，Σn为全部萌发种子总数；

GE(％)＝(第3天萌发的种子数/供试种子总数)×100％；

GP(％)＝(n/N)×100％，n为前7天全部萌发种子总数，N为供试种子总数；

GI＝Σ(Gt/Dt)，Gt为t天内的发芽数，Dt为相应的发芽天数；

STI＝Σ(GP+GE+GI)/mn，m为计算指标项数，n为盐浓度梯度个数；

RSDR(％)＝(对照萌发率-处理萌发率)/对照萌发率×100％；

试验数据采用Excel 2010和SPSS17.0软件进行显著性统计分析，采用SigmaPlot10.0软件作图。结果以平均值±标准误表示；

步骤7，适宜筛选耐盐种质的天然海水浓度确定

根据种子萌发特性相关指标与耐盐相关指标结果变化，将具有显著差异的拐点所对应的胁迫浓度确定为藜麦种子耐盐萌发的天然海水适宜浓度条件；

步骤8，耐盐材料筛选与确定

根据不同藜麦种子材料在天然海水胁迫下的耐盐性差异比较，筛选出藜麦耐盐材料。