[发明专利]柑橘全爪螨对双甲脒抗性的分子标记及其应用和检测方法有效
| 申请号： | 202010921051.3 | 申请日： | 2020-09-04 |
| 公开（公告）号： | CN112029870B | 公开（公告）日： | 2021-10-22 |
| 发明（设计）人： | 于士将;丛林;冉春;刘浩强;李鸿筠 | 申请（专利权）人： | 西南大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 重庆双马智翔专利代理事务所(普通合伙) 50241 | 代理人： | 顾晓玲 |
| 地址： | 400715*** | 国省代码： | 重庆;50 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 柑橘 全爪螨 双甲脒 抗性 分子 标记 及其 应用 检测 方法 | ||
1.一种柑橘全爪螨对双甲脒抗性的分子标记，其特征在于：所述分子标记的核苷酸序列如SEQ ID No:5所示。
2.检测权利要求1所述的分子标记的试剂在柑橘全爪螨对双甲脒敏感品系和抗性品系的分类中的应用。
3.检测权利要求1 所述的分子标记的特异性正反向引物，其特征在于：所述引物序列如下：F：5’- AACCTTCAGAATCAGTGTAATCATC -3’；R：5’-CTTCCATAGATTGTTGTTGTTGTTG -3’。
4.一种柑橘全爪螨对双甲脒抗性的分子标记的检测方法，其特征在于：先提取待测柑橘全爪螨的总DNA，以总DNA 为模板用权利要求3 中的特异性正反向引物进行PCR 扩增，得到包含突变区域的β-2R 章鱼胺受体基因片段，将得到的基因片段与权利要求1 中的柑橘全爪螨对双甲脒的分子标记进行序列比对，即可判断该品系是对双甲脒的敏感品系还是抗性品系。
5.如权利要求4 所述的检测方法，其特征在于：所述PCR 扩增的反应体系为：2 ×Phanta Max Master Mix 25 μL，浓度10 μM 的正反向引物各2 μL，待测样本DNA 模板2 μL，补充ddH2O 至50μL。
6.如权利要求4 或5 所述的检测方法，其特征在于：所述PCR 的扩增程序为：95℃预变性3 min；然后95℃变性15 sec，54℃退火15 sec，72℃延伸10 sec，40 个循环；最后72℃延伸5min。
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