[发明专利]一种茶树花青素还原酶蛋白抗原多肽及其抗体、检测试剂盒和应用

说明书

本发明属于蛋白质检测技术领域，具体涉及一种茶树花青素还原酶蛋白抗原多肽及其抗体、检测试剂盒和应用。所述的茶树花青素还原酶蛋白抗原多肽为茶树花青素还原酶1抗原多肽和花青素还原酶2蛋白抗原多肽中的至少一种，其中，茶树花青素还原酶1抗原多肽的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，茶树花青素还原酶2抗原多肽的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明还提供了茶树花青素还原酶蛋白的免疫抗原和检测抗原以及抗茶树花青素还原酶蛋白抗原的抗体。该抗体不仅可以为该蛋白的功能研究奠定基础，同时对茶树体内后续开展类黄酮等物质代谢相关研究具有积极的参考意义。

技术领域

本发明属于蛋白质检测技术领域，具体涉及一种茶树花青素还原酶蛋白抗原多肽及其抗体、检测试剂盒和应用。

背景技术

花青素还原酶1(Anthocyanidin reductase 1，ANR1)和花青素还原酶2(Anthocyanidin reductase 2，ANR2)，ANR1和ANR2作为类黄酮生物合成代谢途径的结构酶之一。ANR1和ANR2均能够将矢车菊素催化形成儿茶素(C)和表儿茶素(EC)，飞燕草色素催化成没食子儿茶素(GC)和表没食子儿茶素(EGC)，因此，ANR1和ANR2均具有差向异构酶活性。ANR1和ANR2不仅是植物体内花青素代谢的关键酶，还对植物体内儿茶素合成积累起到关键调节作用。而茶树中花青素和儿茶素等类黄酮物质含量会因生长条件、品种及组织部位的不同而存在差异，这可能是由于ANR1和ANR2酶基因表达的差异，也可能是ANR1和ANR2蛋白表达上的差异。

从蛋白质表达水平上对后续研究和解释不同茶树品种，或者茶树不同组织、部位花青素和儿茶素等含量的差异有着重要的价值。然而，目前关于ANR1和ANR2蛋白水平上的研究仍然有限，并且没有针对ANR1和ANR2的商业化抗体出售，也不能检测其在蛋白水平上的表达情况，无法在蛋白表达水平上揭示ANR1和ANR2对茶树不同品种，不同组织、部位花青素和儿茶素等物质合成的调控作用。

发明内容

为了克服现有技术的不足和缺点，本发明的首要目的在于提供一种茶树花青素还原酶蛋白抗原多肽。

本发明的另一目的在于提供一种茶树花青素还原酶蛋白的免疫抗原和检测抗原。

本发明的再一目的在于提供一种抗茶树花青素还原酶蛋白的抗体。

本发明的第四个目的在于提供上述茶树花青素还原酶蛋白抗原多肽、免疫抗原、检测抗原和抗体的应用。

本发明的第五个目的在于提供一种茶树花青素还原酶的检测试剂盒，该试剂盒可实现商品化快速检测的目的。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

一种茶树花青素还原酶蛋白抗原多肽，为茶树花青素还原酶1(ANR1)抗原多肽和花青素还原酶2(ANR2)蛋白抗原多肽中的至少一种，其中，茶树花青素还原酶1抗原多肽的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，茶树花青素还原酶2抗原多肽的氨基酸序列如SEQ IDNo.2所示；

一种茶树花青素还原酶蛋白的免疫抗原，为将上述茶树花青素还原酶蛋白抗原多肽与载体蛋白通过酰胺键偶联得到；

所述载体蛋白包优选为卵清蛋白或血蓝蛋白；

所述的偶联优选为SMCC法；

一种茶树花青素还原酶蛋白的检测抗原，为将上述茶树花青素还原酶蛋白抗原多肽与载体蛋白通过酰胺键偶联得到；

所述载体蛋白优选为牛血清白蛋白；

所述的偶联优选为戊二醛法；

一种抗茶树花青素还原酶蛋白抗原的抗体，为由上述茶树花青素还原酶蛋白的免疫抗原免疫动物产生的抗体；

所述的抗体优选为单克隆抗体和多克隆抗体中的至少一种；