[发明专利]棉花品种“中棉所96A”的DNA指纹图谱构建方法及其应用在审
申请号: | 202010927444.5 | 申请日: | 2020-09-07 |
公开(公告)号: | CN112063739A | 公开(公告)日: | 2020-12-11 |
发明(设计)人: | 匡猛;张西岭;彭军;黄殿成;周大云;孙君灵;黄龙雨;吴玉珍;张鹏飞;彭凯;王延琴 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院棉花研究所 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11 |
代理公司: | 北京盛询知识产权代理有限公司 11901 | 代理人: | 方亚兵 |
地址: | 455000 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 棉花 品种 96 dna 指纹 图谱 构建 方法 及其 应用 | ||
1.用于检测棉花品种“中棉所96A”的引物组合,其特征在于,所述引物组合包括下表所列的60对引物:
2.棉花品种“中棉所96A”的DNA指纹图谱构建方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)提取棉花品种“中棉所96A”的基因组DNA;
2)以步骤1)提取的基因组DNA为模板,利用权利要求1所述PCR引物组合进行PCR扩增;
3)检测PCR扩增产物。
3.如权利要求2所述的棉花品种“中棉所96A”的DNA指纹图谱构建方法,其特征在于,PCR反应体系为20μL反应体系,具体包括ddH2O 13.0μL,含25mmol/L MgCl2的10×缓冲液2.0μL,dNTPs1.6μL,Taq酶0.2μL,正向引物0.1μL,反向引物0.1μL,DNA3.0μL。
4.如权利要求2所述的棉花品种“中棉所96A”的DNA指纹图谱构建方法,其特征在于,PCR扩增程序为:a)预变性:94℃ 5min;b)扩增:94℃变性45s,60℃退火45s,72℃延伸45s,进行32次循环;c)终延伸:72℃ 10min,d)扩增产物于4℃保存。
5.如权利要求2所述的棉花品种“中棉所96A”的DNA指纹图谱构建方法,其特征在于,PCR产物的检测方法为毛细管电泳法。
6.权利要求2-5任一项所述的棉花品种“中棉所96A”的DNA指纹图谱构建方法在鉴别棉花品种“中棉所96A”真伪中的应用。
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