[发明专利]一种增强CIK细胞杀伤力的方法、CIK细胞及应用

说明书

本发明公开了一种增强CIK细胞杀伤力的方法、CIK细胞及应用。本发明发现，将人外周血单个核细胞先在细胞因子的存在下进行培养，再在细胞因子和ALDH2激活剂共同存在下进行培养可以有效提高CIK细胞中主要效应细胞CD3+CD56+的比例，从而有效提高CIK细胞对肿瘤细胞的杀伤力。使用该培养方法制备得到CIK细胞可以用于制备抗肿瘤药物。

技术领域

本发明属于生物领域，涉及免疫细胞的培养制备和应用，具体涉及一种增强CIK细胞杀伤力的方法、CIK细胞及应用。

背景技术

细胞因子诱导杀伤细胞(cytokine-induced killer cells,CIK)是由CD3+CD56+细胞、CD3+CD56-细胞和一小部分CD3-CD56+细胞组成的异质型细胞群。其中CD3+CD56+细胞是CIK细胞的主要效应细胞，以无非主要组织相容性复合体限制(majorhistocompatibility complex,MHC)的方式发挥其杀伤肿瘤细胞的活性。临床研究表明以CIK细胞为基础的细胞治疗在很大程度上改善了患者的生存质量、总体生存时间和总生存数，使其备受关注。但是，外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclearcells,PBMC)中CD3+CD56+细胞的含量只有1％～5％，不能满足临床需求(龚子祯等，黄原胶支持CIK细胞高密度扩增，高校化学工程学报，第33卷第1期，2019年2月)。

CD3+CD56+细胞是CIK细胞的主要效应细胞，因此通过有效的方法提高CD3+CD56+细胞的比例可以有效提高CIK细胞的杀伤力。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种增强CIK细胞杀伤力的方法、CIK细胞及应用，该方法主要是通过提高CIK细胞中CD3+CD56+细胞的比例。

本发明目的通过如下技术方案实现：

一种增强CIK细胞杀伤力的方法，该方法包括将CIK细胞在ALDH2激活剂的存在下进行培养。ALDH2激活剂的存在可以提高CIK细胞中CD3+CD56+细胞的比例。

一种增强CIK细胞杀伤力的方法，该方法为将人外周血单个核细胞先在细胞因子的存在下进行培养，再在细胞因子和ALDH2激活剂共同存在下进行培养。

进一步地，所述细胞因子包括IFN-γ、抗CD3 McAb和rhIL-2。

进一步地，所述ALDH2激活剂为丹参内酯或丹参新酮。

一种CIK细胞，采用上述方法培养的到。

上述CIK细胞在制备抗肿瘤药物中的应用。

ALDH2激活剂用于CIK细胞体外培养提高其杀伤力的用途。

进一步地，所述ALDH2激活剂为丹参内酯或丹参新酮。

有益效果：

本发明研究表明，将人外周血单个核细胞先在细胞因子的存在下进行培养，再在细胞因子和ALDH2激活剂共同存在下进行培养可以有效提高CIK细胞中主要效应细胞CD3+CD56+的比例，从而有效提高CIK细胞对肿瘤细胞的杀伤力。使用该培养方法制备得到CIK细胞可以用于制备抗肿瘤药物。

附图说明

图1为各组CIK细胞中CD3⁺CD56⁺细胞比例；

图2为各组CIK细胞中ALDH2蛋白表达水平；

图3为各组CIK细胞对肿瘤细胞的杀伤力。

具体实施方式

一、实验材料

PBMC人外周血单个核细胞购自深圳市豪地华拓生物科技有限公司，冻存发货。