[发明专利]靶向于EGFR的抗体偶联药物、制备方法及应用

说明书

本发明涉及生物技术和药物领域，具体涉及一种靶向于EGFR的抗体偶联药物、制备方法。该抗体偶联药物由抗体、细胞毒性药物以及连接子组成，抗体为西妥昔单克隆抗体，细胞毒性药物为雷公藤红素，连接子为琥珀酰亚胺酯接头。雷公藤红素先被改造成雷公藤红素琥珀酰亚胺酯形式，再与西妥昔单克隆抗体的酰胺键反应制得抗体偶联药物。该偶联物具有西妥昔单抗和雷公藤红素两者的协同生物学功能，既能够靶向EGFR抗原，又有强烈的杀伤肿瘤细胞的活性。且相较于Cetuximab本身，并未影响抗体的亲和力，抑制性和靶向性，较好的保留了其生物学功能。在体外活性评价中，相较于CTX与CLS单用以及联用，等浓度的Cetuximab‑SE‑Celastrol效果更佳，在二者的协同作用下，表现出明显的抗肿瘤效果。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及靶向于EGFR的抗体偶联药物、制备方法及应用。

背景技术

肿瘤的发病率和死亡率一直位于各种疾病前列，根据世界卫生组织国际癌症研究中心(International Agency for Research on Cancer,IARC)2018年的资料显示，2018年全世界约1800万癌症患者。目前针对肿瘤的内科治疗主要有三大块：放化疗、分子靶向治疗、免疫治疗。但耐药机制的产生，以及毒副作用较大，大大的降低了以上治疗方案的临床疗效。随着分子生物学的发展，抗体偶联药物品治疗成为了肿瘤治疗的新方向。

表皮生长因子受体(EGFR)是一种跨膜酪氨酸激酶受体，在大多数结直肠癌(CRC)细胞中呈高表达，当EGFR与体内的配体结合后会激活多条信号通路。其中明确的与肿瘤相关的信号通路有Ras/Raf/MEK/MAPK和PI3K/Akt等，激活可导致肿瘤细胞的增殖、抑制其凋亡、促进侵袭以及转移的发生，因此EGFR一直是结直肠肿瘤研究和治疗的一个重要靶点。

西妥昔单克隆抗体(Cetuximab，CTX)是针对EGFR受体的人-鼠嵌合的IgG1单克隆抗体，通过竞争性的与EGFR特异性结合，从而阻断EGFR下游信号通路，发挥抗肿瘤的作用。在靶向治疗过程中，由于基因突变以及多靶点以及多条信号通路的代偿性激活等原因，导致其运用受到局限，因此针对以上原因，联合其他药物或多细胞毒性药物有可能解决CRC耐药。

雷公藤红素(Celastrol，CLS)是中药雷公藤的主要活性成分之一，对多种肿瘤均有较强的抑制作用。然而，雷公藤难溶于水，制成药物制剂有一定困难。此外，虽然CLS对肿瘤的抑制具有许多潜在靶点，但雷公藤对细胞的凋亡作用是非组织、器官和细胞特异的，且具有免疫抑制性以及细胞毒性，极大限制了其临床应用。靶向给药系统或许是解决雷公藤非特异性的有效方法。

ADC是以抗体作为载体(antibody)，通过连接子(linker)连接细胞毒性药物(warhead)，既提高了细胞毒药物的靶向性，减少其对其他组织的细胞毒性，又增加抗体的抗肿瘤活性，从整体上提高了治疗效果，实现“精准医疗”。目前已有三个ADC药物经FDA批准上市，即Gemtuzumab ozogamicin(Mylotarg),bretuximab vedotin(Adcetris),ado-trastuzumabemtansine(Kadcyla(T-DM1)，其中基因泰克研发的Trastuzumab Emtansine(Kadcyla)，利用经典的曲妥珠单抗作为抗体，联合微管蛋白抑制剂DM1能达到曲妥珠单抗联合紫杉醇的协同治疗效应，上市之后取得了很好的销售业绩。

借助CTX与CLS合成的抗体偶联药(Antibody-drug conjugate,ADC)，增强CTX对肿瘤细胞的抑制作用，提高CLS的靶向性，减少CLS对周围健康细胞的毒性，将细胞毒性定点作用于肿瘤细胞，这无疑是CTX以及CLS的临床应用的新机会。

发明内容

本发明的目的之一在于提供由西妥昔单克隆抗体(Cetuximab，CTX)和雷公藤红素(Celastrol，CLS)偶联形成的抗体偶联药物Cetuximab-SE-Celastrol及其制备方法。