[发明专利]一种抗羟苯磺酸钙干扰的肌酐含量检测试剂盒及其应用

说明书

本发明属于肌酐生化诊断技术领域，涉及一种抗羟苯磺酸钙药物干扰的人血清中肌酐含量检测试剂盒及检测方法。本发明的检测试剂盒中包括R1试剂和R2试剂，其中R1试剂包含：肌酸脒基水解酶、肌氨酸氧化酶、抗坏血酸氧化酶、过氧化氢酶、葡萄糖氧化酶、葡萄糖、以及ESPMT；R2试剂包含：肌酐胺基水解酶、过氧化物酶、4‑氨基安替比林。本发明提供的检测试剂盒可以消除羟苯磺酸钙对过氧化氢的影响，使得试剂盒最终的显色反应不受影响，从而实现了提高肌酐检测试剂盒准确性、增加试剂盒的稳定性。

技术领域

本发明属于肌酐生化检测技术领域，涉及一种抗羟苯磺酸钙干扰的肌酐含量检测试剂盒及其应用。

背景技术

肌酐(Serum creatinine，CREA)，是肌酸的终末代谢物。血浆肌酐浓度和尿中肌酐排泄量，正常时主要与体内肌肉总量关系密切。肝脏疾病时，肌酐合成减少，则尿中肌酐排泄量可减少。肌酐为小分子物质，可以顺利通过肾小球滤过。因此，血浆肌酐浓度与尿液肌酐排泄量是肾小球滤过功能的有用指标。

目前临床上对人体血清肌酐的检测主要是通过肌酐检测试剂盒来检测，而市场上售卖的肌酐检测试剂盒通常使用的是肌氨酸氧化酶法测定，肌酐肌氨酸氧化酶法试剂盒的主要反应原理大都基于Trinder反应模式，具体反应过程如下：

肌酐+H₂O+肌酐胺基水解酶→肌酸

肌酸+H₂O+肌酸脒基水解酶→肌氨酸+尿素

肌氨酸+H₂O+O₂+肌氨酸氧化酶→甘氨酸+HCHO+H₂O₂

2H₂O₂+4-氨基安替比林+*ESPMT+过氧化物酶→醌亚胺+4H₂O

*ESPMT：N-乙基-N-磺丙基-间-甲苯胺(TOPS)。

但是，酶法测定肌酐的试剂盒存在以下问题：生成的H₂O₂会与样本中的羟苯磺酸钙迅速发生反应，消耗一部分H₂O₂，这样就导致H₂O₂在过氧化物酶的催化下与4-氨基安替比林和TOPS反应生成红色醌亚胺化合物减少，而红色醌亚胺化合物的生成量与样本中的肌酐的含量呈正比，通过测定红色醌亚胺化合物的吸光度即可得到样品中肌酐的浓度，由此测定的肌酐浓度也相应的减少，有可能造成假阴性的结果，对病情的判断带来失误。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种抗羟苯磺酸钙药物干扰的肌酐含量检测试剂盒及其应用。本发明提供的试剂盒中添加葡萄糖，使之先氧化产生H₂O₂，可以消除羟苯磺酸钙对过氧化氢的影响，使得试剂盒最终的显色反应不受影响，从而实现了提高肌酐检测试剂盒准确性、增加试剂盒的稳定性。

第一方面，本发明提供了一种抗羟苯磺酸钙药物干扰的肌酐含量检测试剂盒，所述检测试剂盒包括R1试剂和R2试剂，所述R1试剂包括肌酸脒基水解酶、肌氨酸氧化酶、抗坏血酸氧化酶、过氧化氢酶、葡萄糖氧化酶、ESPMT(TOPS)及葡萄糖。

基于上述技术方案，本发明在现有技术的肌酐检测试剂盒中独创性的在R1试剂中添加葡萄糖及葡萄糖氧化酶，通过在R1试剂中加入葡萄糖，使得葡萄糖能够先氧化产生H₂O₂与样本中的羟苯磺酸钙发生反应，使羟苯磺酸钙失去干扰酶法肌酐检测的作用，提升肌氨酸氧化酶法检测的准确性。

本发明还可以针对上述技术方案做进一步改进，具体改进如下，

进一步地，所述R1试剂中各个物质的浓度为：