[发明专利]IL1R1基因人源化改造的非人动物的构建方法及其应用

权利要求书

1.一种IL1R1基因人源化改造的非人动物的构建方法，其特征在于，所述的非人动物的基因组中包含人IL1R1基因或者编码人IL1R1蛋白的核苷酸序列，所述编码的人IL1R1蛋白如SEQ ID NO.2第24至325位所示氨基酸，或者所述的人IL1R1基因如SEQ ID NO.5所示核苷酸序列，所述的构建方法包括用包含编码SEQ ID NO.2第24至325位氨基酸的核苷酸序列或者包含SEQ ID NO.5所示核苷酸序列替换至非人动物IL1R1基因座上，所述的非人动物体内表达人源化IL1R1蛋白，所述的人源化IL1R1蛋白如SEQ ID NO.10所示的氨基酸序列，所述的构建方法包括使用靶向载体进行非人动物的构建，所述的靶向载体包含5’臂、3’臂，所述的5’臂如SEQ ID NO.3所示，所述的3’臂如SEQ ID NO.4所示，所述的靶向载体还包括用于阳性克隆筛选的抗性基因，即新霉素磷酸转移酶编码序列Neo，并在抗性基因的两侧装上两个同向排列的位点特异性重组系统Frt重组位点，组成Neo盒（Neo cassette），所述的Neo盒5’端与小鼠基因的连接设计如SEQ ID NO.7所示，所述的Neo盒3’端与小鼠基因的连接设计如SEQ ID NO.8所示，所述的非人动物为小鼠。

2.一种靶向载体，其特征在于，所述的靶向载体包含人IL1R1基因或者编码人IL1R1蛋白的核苷酸序列，所述编码的人IL1R1蛋白如SEQ ID NO.2第24至325位所示氨基酸，或者所述的人IL1R1基因如SEQ ID NO.5所示核苷酸序列，所述的靶向载体还包含5’臂、3’臂，所述的5’臂如SEQ ID NO.3所示，所述的3’臂如SEQ ID NO.4所示，所述的靶向载体还包括用于阳性克隆筛选的抗性基因，即新霉素磷酸转移酶编码序列Neo，并在抗性基因的两侧装上两个同向排列的位点特异性重组系统Frt重组位点，组成Neo盒（Neo cassette），所述的Neo盒5’端与小鼠基因的连接设计如SEQ ID NO.7所示，所述的Neo盒3’端与小鼠基因的连接设计如SEQ ID NO.8所示。

3.权利要求1所述的构建方法在IL1R1基因或蛋白相关研究中的应用，所述应用不是疾病的诊断和治疗方法，所述的应用包括：

A）涉及人类细胞的免疫过程的产品开发，制造或筛选人类抗体中的应用；

B）作为药理学、免疫学、微生物学和医学研究的模型系统中的应用；

C）涉及人类细胞的免疫过程的生产和利用动物实验疾病模型，用于病原学研究中的应用；

D）在体内研究人IL1R1信号通路调节剂的筛选、药效检测、评估疗效、验证或评价；或者，

E）研究IL1R1基因功能，研究人IL1R1抗体，研究针对人IL1R1靶位点的药物、药效，研究心血管疾病、自身免疫性疾病、感染性疾病、退行性疾病、睡眠疾病、肿瘤或炎症相关疾病药物方面的用途。