[发明专利]OPTN基因在鉴定牙髓干细胞中的应用和鉴定牙髓干细胞的方法与产品

说明书

本发明涉及生物技术领域，具体而言，提供了OPTN基因在鉴定牙髓干细胞中的应用和鉴定牙髓干细胞的方法与产品。发明人通过试验首次发现可以用于鉴定牙髓干细胞的生物标志物OPTN基因，通过该基因的差异表达，能够鉴定分离出高纯度的牙髓干细胞。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体而言，涉及基于OPTN的检测方法用于鉴定牙髓干细胞。

背景技术

牙髓间充质干细胞（DPSCs），作为间充质干细胞（MSC）的一种类型，是从成人的牙齿的牙髓组织中，分离出来的一种成体干细胞。研究证明了DPSCs是一种具有高度增殖和多向分化能力的间充质干细胞。分离得到的DPSCs可以在体外的一定培养条件下，分化成为成骨、成软骨、成脂和成神经细胞等。DPSCs除了在牙科组织工程中具有良好的应用前景，还被广泛应用在再生医疗领域。相比于胚胎干细胞，DPSCs没有伦理的问题，也没有免疫排斥，不存在致瘤性等问题。所以DPSCs是一种很好的潜在的临床应用细胞材料。

口腔干细胞目前已经分离鉴别出至少八类干细胞，成人牙髓干细胞(DPSC)、脱落乳牙牙髓干细胞(SHED)、牙根尖乳头干细胞(SCAP)、牙囊干细胞(DFSC)、牙龈干细胞(GMSC)、牙周膜干细胞(PDLSC)、牙胚干细胞(TGPC)、牙槽骨干细胞(ABMSC)等。不同干细胞的增殖、分化和临床应用均有不同，然而，对于这些来自口腔不同位置干细胞亚群的鉴定，目前并没有有效的工具，现有技术中通过流式细胞技术等进行鉴定成本较高而且过程繁琐。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一目的在于提供OPTN基因在鉴定牙髓干细胞中的应用。

本发明的第二目的在于提供一种鉴定牙髓干细胞的方法。

本发明的第三目的在于提供一种鉴定牙髓干细胞的试剂盒。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

OPTN基因在鉴定牙髓干细胞中的应用，待鉴定细胞包括牙周膜干细胞、牙髓干细胞和牙龈干细胞。

进一步地，OPTN基因在牙髓干细胞中相较于牙龈干细胞和牙周膜干细胞均为高表达。

进一步地，OPTN基因的检测引物如下所示：

OPTN-F：5’-AGCAAACCATTGCCAAGC-3’（SEQ ID NO.1）；

OPTN-R：5’-TTTCAGCATGAAAATCAGAACAG-3’（SEQ ID NO.2）。

一种鉴定牙髓干细胞的方法，该方法通过特异性检测待鉴定细胞内OPTN基因的表达水平判定待鉴定细胞是否为牙髓干细胞；

待鉴定细胞包括牙周膜干细胞、牙髓干细胞和牙龈干细胞。

进一步地，特异性检测采用real-time RT-PCR。

进一步地，real-time RT-PCR的OPTN基因检测引物如下：

OPTN-F：5’-AGCAAACCATTGCCAAGC-3’（SEQ ID NO.1）；

OPTN-R：5’-TTTCAGCATGAAAATCAGAACAG-3’（SEQ ID NO.2）。

进一步地，判定的参考标准为：待鉴定细胞的OPTN基因Ct值大于GAPDH基因Ct值，且△Ct值小于等于9为牙髓干细胞，其中，△Ct=Ct_-OPTN-Ct_-GAPDH。

进一步地，GAPDH基因检测引物如下：

GAPDH-F: 5’-GAGCGAGATCCCTCCAAA-3’（SEQ ID NO.3）；