[发明专利]一种用于自体淋巴细胞培养的组合物、培养液及其应用

说明书

本发明公开了一种用于自体淋巴细胞培养的组合物、培养液及其应用。本发明所要保护的用于自体淋巴细胞培养的组合物的活性成分由血浆、抗人CD3单克隆抗体、IL‑2、IL‑7、IL‑15和PHA‑P组成。相比较于作为对照的用于培养淋巴细胞的组合物，使用含有本发明所提供的组合物的培养基诱导培养外周血单个核细胞得到的T淋巴细胞亚群的含量显著升高；淋巴细胞数量在培养14天时也显著升高，升高了1.15倍；淋巴细胞对K562细胞的杀伤活性也显著增强，增强了1.6倍。本发明所提供的用于自体淋巴细胞培养的组合物可以用于特异性诱导扩增单个核细胞产生具有高纯度和较强生物学活性的自体淋巴细胞。

技术领域

本发明涉及淋巴细胞培养技术领域，具体涉及一种用于自体淋巴细胞培养的培养液。

背景技术

淋巴细胞作为一类不均一的细胞群体，包括许多具有不同免疫功能的亚群。是机体免疫应答功能的重要细胞组分，是淋巴系统几乎全部免疫功能的主要执行者，是机体抵抗外界感染和监控体内细胞变异的一线防御系统。淋巴细胞作为一类具有免疫识别功能的细胞系，根据其发生迁移、表面蛋白分子和功能的不同，可以分为T淋巴细胞、B淋巴细胞和自然杀伤(NK)细胞。淋巴细胞的过继免疫疗法(adoptive immunotherapy)是指通过体外诱导扩增具有抗肿瘤活性的淋巴细胞，过继于患者体内，通过激活机体的细胞和体液免疫应答，重启并维持肿瘤-免疫循环，恢复机体正常的抗肿瘤免疫反应，从而达到控制和清除肿瘤的目的。现有体外诱导扩增自体淋巴细胞制备技术，由于不能产业化生产，质量较难控制，限制其临床的广泛应用。亟需一种可满足产业化生产需求，扩增效率稳定的可以满足临床治疗需求的淋巴细胞培养基。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是如何培养高细胞纯度的淋巴细胞或如何培养具有较强生物活性的淋巴细胞或如何改善免疫细胞的增殖状态或如何使淋巴细胞的扩增效率稳定。

为了解决上述技术问题，本发明首先提供了一种用于培养淋巴细胞的组合物。

本发明所提供的用于培养淋巴细胞的组合物由血浆、抗人CD3单克隆抗体(克隆号OKT3)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-7(IL-7)、白细胞介素-15(IL-15)、植物凝集素P(PHA-P)组成。所述组合物中，血浆、抗人CD3单克隆抗体、IL-2、IL-7、IL-15和PHA-P的配比为血浆50～200uL，人CD3单克隆抗体50～150ng，PHA-P 100～1000ng，IL-2 300～1000U，IL-7 10～50ng，IL-15 30～100ng。

上述组合物中，血浆、抗人CD3单克隆抗体、IL-2、IL-7、IL-15和PHA-P的配比为血浆100μL，人CD3单克隆抗体50～150ng，PHA-P 100～1000ng，IL-2 300～1000U，IL-7 10～50ng，IL-15 30～100ng。

上述组合物中，血浆、抗人CD3单克隆抗体、IL-2、IL-7、IL-15和PHA-P的配比为血浆100uL，人CD3单克隆抗体100ng，PHA-P 500ng，IL-2 500U，IL-7 25ng，IL-15 50ng。

上述血浆为患者的自体血浆，上述淋巴细胞为患者的自体淋巴细胞。

上述淋巴细胞可为哺乳动物淋巴细胞，如人淋巴细胞。所述淋巴细胞可为患者的自体淋巴细胞。

上述血浆可为哺乳动物血浆，如人血浆。所述血浆可为患者的自体血浆。

上述组合物除了所述活性成分外，还可含有注射用水。

上述组合物中，各组分可以混合在一起，也可以各自独立包装，使用时再混合在一起。

含有上述组合物的试剂或试剂盒也属于本发明的保护范围，所述试剂盒用于培养淋巴细胞。

上述试剂或试剂盒包括用于培养淋巴细胞的基础培养基。