[发明专利]含植物外泌体的可调理肠道提高免疫力的组合物

权利要求书

1.含植物外泌体的可调理肠道提高免疫力的组合物，其特征在于，所述组合物包含：果蔬粉、抗性糊精、菊粉、低聚木糖、水苏糖、决明子粉、郁李仁粉、荷叶粉、火麻仁粉、木糖醇、赤藓糖醇和植物外泌体，所述植物外泌体选自姜黄外泌体冻干粉。

2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，按照重量份数计，所述组合物包含：果蔬粉5-15份、抗性糊精20-40份、菊粉5-20份、低聚木糖5-15份、水苏糖2-10份、决明子粉1-8份、郁李仁粉1-5份、荷叶粉1-5份、火麻仁粉1-5份、木糖醇3-15份、赤藓糖醇5-15份、姜黄外泌体冻干粉0.1-2份。

3.根据权利要求2所述的组合物，其特征在于，所述组合物还包含生姜外泌体冻干粉，所述生姜外泌体冻干粉的重量份数为0.1-2份。

4.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述姜黄外泌体冻干粉为包裹于微囊中的姜黄外泌体冻干粉。

5.根据权利要求4所述的组合物，其特征在于，所述微囊包含一次包衣和二次包衣。

6.根据权利要求5所述的组合物，其特征在于，所述一次包衣的成分选自海藻酸钠，所述二次包衣的成分选自壳寡糖。

7.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述姜黄外泌体冻干粉中还加入有冻干保护剂，所述冻干保护剂选自抗性糊精。

8.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述姜黄外泌体冻干粉的制备方法包含以下步骤：

S1.姜黄外泌体的提取

称取100-200g新鲜姜黄倒入破碎机中，向其中加入100-200mL灭菌PBS，破碎匀浆之后在3000-4000g，4℃离心10-30min，去除较大的残渣；取中间层的黄色透明溶液在10000-15000g，4℃离心40-70min；取上清液在120000-150000g，4℃超速离心60-80min，然后使用1mL无菌PBS重悬沉淀再在120000-150000g，4℃超速离心60-80min；离心后，用1-2mL无菌PBS重悬沉淀，即得姜黄外泌体提取液；

S2.姜黄外泌体的微囊包埋

①内源乳化法制备微胶囊

1）乳化过程：制备质量份数为1%-4%的海藻酸钠溶液与15-25 mmoL/L Ca-EDTA混合溶液，取10-25 mL制备好的混合溶液与5-15 mL姜黄外泌体提取液混合均匀，加入到含0.5-1.5% span80 的65-70mL玉米胚芽油中，250-350 r/min、10-20 min下机械搅拌；

2）酸化过程：逐滴加入含有0.15-0.25 g冰醋酸的10-25 mL玉米胚芽油，100-150 r/min、25-35 min下机械搅拌，冰乙酸和EDTA-Ca的摩尔比为4.5-5.5；

3）收集过程：加入150-200 mL含0.9% NaCl 的磷酸盐缓冲液，静置1-2h，弃去油层，离心，洗涤，收集，即得海藻酸钠微胶囊；

②制备壳寡糖包衣的微胶囊

先将0.5g壳寡糖溶解于90mL纯净水中，用0.1 mol/L的NaOH溶液将pH值调节至7.0，再用纯净水将溶液的总体积调节至100 mL，即得5 mg/mL的壳寡糖溶液；将8-12 g海藻酸钠微胶囊浸入100 mL过滤除菌的5 mg/mL壳寡糖溶液中，用磁力搅拌器80 -120 r/min搅拌15-30 min进行涂覆，过滤收集微胶囊；

S3.姜黄外泌体的真空冷冻干燥

先将步骤S2得到的微胶囊与冻干保护剂抗性糊精按照1:10-15的比例进行混合，再将添加有冻干保护剂的姜黄外泌体微胶囊进行真空冷冻干燥，在进行真空冷却干燥前需进行具体的真空冷冻干燥工艺为：在-40--30℃左右冷冻1-2h直至物料中心温度在-30--20℃，再将物料放置加热板进行加热，在0.5-1h内将加热板温度升高至90-100℃，并在此温度下维持4-5h；在0.5-1h内将加热板温度降至80-90℃，并在此温度下维持4-5h；在0.5-1h内将加热板温度降至70-80℃，并在此温度下维持5h；在0.5-1h内将加热板温度升高至50-70℃，并在此温度下维持4-5h直至物料温度不再变化后取出，即为姜黄外泌体冻干粉。