[发明专利]一种马铃薯蛋白质提取分离方法

权利要求书

1.一种马铃薯蛋白质提取分离方法，其特征在于：包括如下步骤：

S1、将称取的马铃薯洗净后，切块，置于-20℃条件下，冷冻脆化1～3h后，在-18～-5℃、CO₂气体保护下进行冷冻破壁，得到马铃薯粉；

S2、向所得的马铃薯粉内加入蛋白裂解剂，冰上负压裂解10～20min，瞬间恢复常压裂解10～20min,再次加入蛋白裂解剂，负压裂解10～20min，瞬间恢复常压裂解10～20min，离心分层，得到上层清液；

S3、向所得的上层清液中加入等体积的20% TCA/丙酮溶液，漩涡振荡，-20℃沉淀过夜，离心分层，得到蛋白沉淀；

S4、将所得的蛋白沉淀在50%水相50%有机相中孵育沉淀，离心分层，得到蛋白沉淀，再次加入蛋白裂解液，负压-正压-负压-常压循环处理2次，每次10～20min，离心分层，真空干燥，即得。

2.如权利要求1所述的一种马铃薯蛋白质提取分离方法，其特征在于：所述的蛋白裂解剂采用无菌水配置，其中尿素含量为8～10 mol/L，二硫苏糖醇含量0.9%，CHAPS含量5.8%，pH值 5～8的Ampholine含量1.7%。

3.如权利要求1所述的一种马铃薯蛋白质提取分离方法，其特征在于：所述步骤S2中，蛋白裂解剂添加量为每克马铃薯粉中添加3～5mL蛋白裂解剂。

4.如权利要求1所述的一种马铃薯蛋白质提取分离方法，其特征在于：所述步骤S2中，第一次负压裂解的真空度为-1.2～-0.90 Mpa；第二次负压裂解的真空度为-1.5～-1.2Mpa。

5.如权利要求1所述的一种马铃薯蛋白质提取分离方法，其特征在于：所述步骤S4中，蛋白裂解剂添加量为每克马铃薯粉中添加2～3mL蛋白裂解剂。

6.如权利要求1所述的一种马铃薯蛋白质提取分离方法，其特征在于：所述步骤S4中，采用真空度-0.90 Mpa至1 Mpa至-1.2 Mpa至常压的循环处理模式，每一次真空度的改变均采用瞬间改变模式。