[发明专利]多蛋白组合生物标志物及应用与心脏瓣膜病并发心房颤动诊断试剂盒

权利要求书

1.一种多蛋白组合生物标志物，其特征在于：由载脂蛋白A1蛋白抗体、血管紧张素原抗体、LIM结构域蛋白7、巨噬细胞集落刺激因子受体1、玻连蛋白抗体和凝血酶原片段F1+2抗体组成。

2.权利要求1所述多蛋白组合生物标志物在制备心脏瓣膜病并发心房颤动检测制剂或医疗器械方面的应用。

3.根据权利要求2所述的多蛋白组合生物标志物的应用，其特征在于：所述医疗器械为心脏瓣膜病并发心房颤动筛查试剂盒。

4.一种应用权利要求1所述多蛋白组合生物标志物的心脏瓣膜病并发心房颤动筛查试剂盒，其特征在于：包含6种蛋白检测组：

第一检测组包括：包被有载脂蛋白A1蛋白抗体的多孔板、载脂蛋白A1纯品作为标准品、生物素标记抗体、辣根过氧化物酶标记亲和素、生物素标记抗体稀释液、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液、样本稀释液、洗涤液、底物溶液和终止液，其中，

所述载脂蛋白A1标准品浓度为0,1.4,4,12,37,111,333,1000ng/ml；

所述生物素标记抗体为生物素化的抗载脂蛋白A1抗体；

所述辣根过氧化物酶标记亲和素为链霉亲和素；

所述生物素标记抗体稀释液为：0.05％叠氮钠，0.01M磷酸缓冲液pH 7.2；

所述辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液：0.01M磷酸缓冲液pH7.20.05％硫柳汞；

所述样本稀释液为86％氯化钠、4.5％磷酸氢二钠、3.5％磷酸二氢钠、5％山羊血清，1％Proclin-300，pH值为6-7；

所述洗涤液：NaCl 9.0g，0.5％吐温20 5ml，加蒸馏水至1000ml；

所述底物溶液为3,3’,5,5’–四甲基联苯胺；

所述终止液：2mol/L硫酸；

第二检测组包括：包被有玻连蛋白抗体的多孔板、玻连蛋白纯品作为标准品、生物素标记抗体、辣根过氧化物酶标记亲和素、生物素标记抗体稀释液、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液、样本稀释液、洗涤液、底物溶液和终止液，其中，

所述玻连蛋白标准品浓度为0，1.56，3.12，6.25，12.5，25，50，100ng/ml；

所述生物素标记抗体为生物素化的抗玻连蛋白抗体；

所述辣根过氧化物酶标记亲和素为链霉亲和素；

所述生物素标记抗体稀释液为：0.05％叠氮钠，0.01M磷酸缓冲液pH7.2；

所述辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液：0.01M磷酸缓冲液pH7.2 0.05％硫柳汞；

所述样本稀释液为85％氯化钠、5％磷酸氢二钠、4％磷酸二氢钠、5％山羊血清，1％Proclin-300，pH值为6-7；

所述洗涤液：NaCl 9.0g，0.5％吐温20 5ml，加蒸馏水至1000ml；

所述底物溶液为3,3’,5,5’–四甲基联苯胺；

所述终止液：2mol/L硫酸；

第三检测组包括：包被有血管紧张素原抗体的多孔板、血管紧张素原蛋白纯品作为标准品、生物素标记抗体、辣根过氧化物酶标记亲和素、洗涤液、底物溶液和终止液，其中，

所述血管紧张素原蛋白标准品浓度0,78,156,312,625,1250,2500,5000pg/ml；

所述生物素标记抗体为生物素化的抗血管紧张素原抗体；

所述辣根过氧化物酶标记亲和素为链霉亲和素；

所述洗涤液：NaCl 9.0g，0.5％吐温20 6ml，加蒸馏水至1000ml；

所述底物溶液为3,3’,5,5’–四甲基联苯胺；

所述终止液：2mol/L硫酸；

第四检测组包括：包被有凝血酶原片段F1+2抗体的多孔板、凝血酶原片段F1+2纯品作为标准品、生物素标记抗体、辣根过氧化物酶标记亲和素、生物素标记抗体稀释液、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液、样本稀释液、洗涤液、底物溶液和终止液，其中，

所述凝血酶原片段F1+2标准品浓度为0,0.03,0.06,0.125,0.25,0.5,1,2nmol/L；

所述生物素标记抗体为生物素化的抗凝血酶原片段F1+2抗体；

所述辣根过氧化物酶标记亲和素为链霉亲和素；

所述生物素标记抗体稀释液为：0.05％叠氮钠，0.01M磷酸缓冲液(PBS)pH7.2；

所述辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液：0.01M磷酸缓冲液(PBS)pH7.2 0.05％硫柳汞；

所述样本稀释液为86％氯化钠、4.5％磷酸氢二钠、3.5％磷酸二氢钠、5％山羊血清，1％Proclin-300，pH值为6-7；

所述洗涤液：NaCl 9.0g，吐温20(0.5％)5ml，加蒸馏水至1000ml；

所述底物溶液为3,3’,5,5’–四甲基联苯胺；

所述终止液：2mol/L硫酸；

第五检测组包括：包被有巨噬细胞集落刺激因子受体1的多孔板，巨噬细胞集落刺激因子受体1纯品作为标准品，生物素标记抗体，辣根过氧化物酶标记亲和素，生物素标记抗体稀释液，辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液，样本稀释液，洗涤液，底物溶液，终止液，其中，

所述巨噬细胞集落刺激因子受体1标准品浓度为0,0.156,0.312,0.625,1.25,2.5,5,10ng/ml；

所述生物素标记抗体为生物素化的抗巨噬细胞集落刺激因子受体1抗体；

所述辣根过氧化物酶标记亲和素为链霉亲和素；

所述生物素标记抗体稀释液为：0.05％叠氮钠，0.01M磷酸缓冲液(PBS)pH7.2；

所述辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液：0.01M磷酸缓冲液(PBS)pH7.2 0.05％硫柳汞；

所述样本稀释液为85％氯化钠、5％磷酸氢二钠、4％磷酸二氢钠、5％山羊血清，1％Proclin-300，pH值为6-7；

所述洗涤液：NaCl 9.0g，0.5％吐温20 5ml，加蒸馏水至1000ml；

所述底物溶液为3,3’,5,5’–四甲基联苯胺；

所述终止液：2mol/L硫酸；

第六检测组包括：包被有LIM结构域蛋白7的多孔板，LIM结构域蛋白7纯品作为标准品，生物素标记抗体，辣根过氧化物酶标记亲和素，生物素标记抗体稀释液，辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液，样本稀释液，洗涤液，底物溶液，终止液，其中，

所述LIM结构域蛋白7标准品浓度为0,1.56,3.12,6.25,12.5,25,50,100pg/ml；

所述生物素标记抗体为生物素化的抗LIM结构域蛋白7抗体；

所述辣根过氧化物酶标记亲和素为链霉亲和素；

所述生物素标记抗体稀释液为：0.05％叠氮钠，0.01M磷酸缓冲液(PBS)pH7.2；

所述辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液：0.01M磷酸缓冲液(PBS)pH7.2 0.05％硫柳汞；

所述样本稀释液为85％氯化钠、5％磷酸氢二钠、4％磷酸二氢钠、5％山羊血清，1％Proclin-300，pH值为6-7；

所述洗涤液：NaCl 9.0g，0.5％吐温20 5ml，加蒸馏水至1000ml；

所述底物溶液为3,3’,5,5’–四甲基联苯胺；

所述终止液：2mol/L硫酸。