[发明专利]一种新型冠状病毒IgM-IgA-IgG抗体胶体金检测试剂盒

权利要求书

1.一种新型冠状病毒IgM-IgA-IgG抗体胶体金检测试剂盒，其特征在于：分别将IgM抗体、IgA抗体、IgG抗体检测的卡条平行装入卡壳中组装成检测卡；三个卡条的包被板的金标区分别包被有胶体金标记抗人IgM、胶体金标记抗人IgA、胶体金标记抗人IgG，检测区包被有新型冠状病毒重组抗原，质控区包被羊抗鼠IgG；其中新型冠状病毒重组抗原为S-RBD蛋白。

2.根据权利要求1所述的新型冠状病毒IgM-IgA-IgG抗体胶体金检测试剂盒，其特征在于：胶体金标记抗人IgA、胶体金标记抗人IgM、胶体金标记抗人IgG的制备方法如下：

向均一的胶体金溶液中添加K₂CO₃，调节pH至6.0-10.0，当偶联抗体时，pH可调节至6.5-8.0，偶联抗原时，将pH调节至8.0-10.0向调好pH的溶液中添加抗人IgA，使其蛋白含量为15-60μg/mL，偶联0.5-4小时，向其中添加终止液，终止偶联反应，终止液的终浓度为1-1.5％；终止反应后的0.5-2小时后离心处理，离心参数为12000-18000RPM，离心处理15-30min，弃上清，沉淀用复溶液复溶，2-8℃保存备用；IgM、IgG抗体标记方法同IgA。

3.一种新型冠状病毒IgM-IgA-IgG抗体胶体金检测试剂盒，其特征在于：包括设有包被板以及样品垫的检测卡，包被板的金标区的胶体金颗粒包被新型冠状病毒重组抗原以及生物素化的牛血清蛋白，检测区不同位置分别包被抗人IgM、抗人IgA、抗人IgG，质控区包被链霉亲和素；其中新型冠状病毒重组抗原为S-RBD蛋白。

4.根据权利要求3所述的新型冠状病毒IgM-IgA-IgG抗体胶体金检测试剂盒，其特征在于：胶体金颗粒包被新型冠状病毒重组抗原的制备方法将胶体金溶液用0.1M K₂CO₃调节pH至8.5-9.0，充分混匀5-10分钟后，向其中添加新型冠状病毒重组抗原，至终浓度为10-30μg/mL，10-30分钟后向其中添加终浓度为0.8-1.2％的牛血清蛋白，30-60分钟后弃上清，10000RPM，离心处理10-15min，弃上清，沉淀用复溶液复溶；按照45-60μL/cm的喷涂量将上述胶体金结合物喷涂在玻璃纤维膜上，并置于35-45℃烘干。

5.根据权利要求1～4任一项所述的新型冠状病毒IgM-IgA-IgG抗体胶体金检测试剂盒，其特征在于：样品垫上涂有样本处理液，所述样本处理液为含BSA的质量浓度为0.5-1.5％、酪蛋白的质量浓度为0.5-1％，蔗糖的质量浓度为0.3-1.2％、海藻糖的质量浓度为0.1-1.2％、Procline的体积浓度为0.05-0.3％、tween-20体积浓度为0.05-0.5％的pH为7.0-7.6的tris缓冲液；且样品垫的制备方法如下，将样品垫处理液以45-85微升每平方厘米的量，喷涂或浸泡玻纤膜或聚酯膜，37-45℃条件下，烘干8-16小时。

6.根据权利要求1～4任一项所述的新型冠状病毒IgM-IgA-IgG抗体胶体金检测试剂盒，其特征在于：胶体金的溶液通过如下方法制备，将氯金酸配制成质量体积比为1％-10％的溶液，再向煮沸的纯化水中添加终浓度为万分之一到万分之四的上述溶液，继续煮沸2-5分钟，将0.1-0.2M的柠檬酸钠，按每100mL氯金酸溶液中添加500-800微升的量，继续搅拌加热10-20分钟，制备出粒径均一的胶体金溶液。

7.根据权利要求1～4任一项所述的新型冠状病毒IgM-IgA-IgG抗体胶体金检测试剂盒，其特征在于：还包括样本稀释液，0.05M PB缓冲液，pH为8.0，向其中加入质量体积比0.5-3％NaCl，质量体积比0.5-5％蔗糖。

8.如权利要求1-7任一项所述的试剂盒在制备新型冠状病毒IgM-IgA-IgG抗体检测试剂中的应用。