[发明专利]一种通用型新型冠状病毒疫苗及其制备方法

说明书

本发明提供了一种通用型新型冠状病毒疫苗及其制备方法，所述疫苗为表达新型冠状病毒结构蛋白S蛋白、E蛋白、M蛋白、N蛋白和非结构蛋白ORF1a多蛋白的融合蛋白的人工抗原递呈细胞，所述疫苗模拟机体的自然免疫系统，在存在细胞因子的情况下，融合蛋白形成的多种多肽片段被抗原递呈细胞所递呈，可以刺激机机体产生免疫反应并形成免疫记忆，具有广谱免疫刺激作用；所述疫苗可以实现快速大规模工业化生产，具有安全性高、成本低的优势。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，涉及一种通用型新型冠状病毒疫苗及其制备方法。

背景技术

新型冠状病毒(SARS-CoV-2)感染人体细胞的关键在于S蛋白与ACE2蛋白的结合。在SARS病毒和MERS病毒中，S蛋白也行使着同样的作用。因此，S蛋白决定了病毒的宿主范围和特异性，是宿主中抗体的重要作用位点，同时也是疫苗、治疗性抗体和诊断试剂的关键靶标。

引起COVID-19的病毒是新出现的冠状病毒变种，病毒的刺突蛋白(S蛋白)与受体ACE2的结合能力比SARS-CoV更强，这也解释了新冠病毒的感染能力强的原因。新型冠状病毒会刺激感染者的先天性免疫系统，使体内释放大量的细胞因子，引起细胞因子风暴和急性炎症反应，从而引发急性呼吸窘迫综合症(ARDS)和多器官衰竭。现阶段尚无有效的疫苗或药物治疗COVID-19，且人们对新型冠状病毒的认识还十分有限，为疫苗研发带来挑战。疫苗研发面临的最大挑战在于找到合适的动物模型，目前主要使用非人类灵长类的感染模型验证研发疫苗的安全性与疗效，但是费用极高，耗时较长。

在现有的病毒疫苗技术中，全病毒抗原疫苗是以传统的灭活病毒或减毒病毒作为抗原，存在安全性低、成本高的问题；病毒特定抗原疫苗是以合成的S蛋白作为抗原，而人工合成S蛋白主要利用细菌、酵母菌、细胞或病毒载体进行表达，存在耗时长、效价单一、病毒易逃逸、有效期短、成本高的问题；DNA和mRNA疫苗注射入体内需要进入细胞并转化成蛋白后才具有免疫作用，免疫原性问题是目前该技术无法突破的瓶颈。

发明内容

针对现有技术的不足和实际需求，本发明提供了一种通用型新型冠状病毒疫苗及其制备方法，所述疫苗采用免疫修饰的抗原递呈细胞表达新型冠状病毒的关键结构蛋白和非结构蛋白，诱导机体产生免疫应答并形成免疫记忆，用于预防与治疗新型冠状病毒感染。

为达此目的，本发明采用以下技术方案：

第一方面，本发明提供了一种新型冠状病毒疫苗组合蛋白，所述疫苗组合蛋白包括新型冠状病毒S蛋白、E蛋白、M蛋白、N蛋白或ORF1a多蛋白中的任意一种或至少两种的组合，形成疫苗刺激反应。

本发明中，含有新型冠状病毒的关键结构蛋白和非结构蛋白的疫苗组合蛋白可以刺激机机体产生免疫反应并形成免疫记忆，具有广谱免疫刺激作用。

第二方面，本发明提供了一种新型冠状病毒疫苗组合融合蛋白，所述融合蛋白包括新型冠状病毒S蛋白信号肽和S蛋白受体结合域；

所述S蛋白受体结合域包括SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列；

SEQ ID NO:1：

PNITNLCPFGEVFNATRFASVYAWNRKRISNCVADYSVLYNSASFSTFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGDEVRQIAPGQTGKIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNNLDSKVGGNYNYLYRLFRKSNLKPFERDISTEIYQAGSTPCNGVEGFNCYFPLQSYGFQPTNGVGYQPYRVVVLSFELLHAPATVCGP。

所述S蛋白信号肽包括SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列；

SEQ ID NO:2：

MFVFLVLLPLVSSQCVNLTTRTQLP。