[发明专利]一种皮肤色素调控蛋白检测芯片及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种皮肤色素调控蛋白的检测芯片，其特征在于，包括检测玻片和固定在所述检测玻片上的抗体，所述抗体包含针对以下靶点蛋白的特异性抗体：

MITF、P38、p-P38、a-MSH、JNK、p-JNK、CREB、P-CREB、CREB-BP、Catenin-β、myosin-Va、RAB27A、ERK、p-ERK、TYR、TRP-1、TRP-2、cAMP、PKA、p-PKA、AGER、PDGFB、iNOS、IL-6、IL-4、NF-kB、Keratin 10、TRPV4、KRT1、INV、Claudin 1、AQP3、DSG1和SIRT1。

2.根据权利要求1所述的检测芯片，其特征在于，所述抗体针对通路a的靶点蛋白、通路b的靶点蛋白、通路c的靶点蛋白、通路d的靶点蛋白和通路e的靶点蛋白；其中：

通路a为黑色素调控通路，其中靶点蛋白包括MITF、P38、p-P38、a-MSH、JNK、p-JNK、CREB、P-CREB、CREB-BP、Catenin-β、myosin-Va、RAB27A、ERK、p-ERK、TYR、TRP-1、TRP-2、cAMP、PKA和p-PKA；

通路b为黄色素调控通路，其中靶点蛋白包括AGER；

通路c为红色素调控通路，其中靶点蛋白包括PDGFB和iNOS；

通路d为皮肤免疫过敏通路，其中靶点蛋白包括IL-6、IL-4、NF-kB、Keratin 10和TRPV4；

通路e为皮肤屏障和保湿通路，其中靶点蛋白包括KRT1、INV、Claudin 1、AQP3、DSG1和SIRT1。

3.根据权利要求2所述的检测芯片，其特征在于，所述抗体由如下蛋白的特异性抗体组成：MITF、P38、p-P38、a-MSH、JNK、p-JNK、CREB、P-CREB、CREB-BP、Catenin-β、myosin-Va、RAB27A、ERK、p-ERK、TYR、TRP-1、TRP-2、cAMP、PKA、p-PKA、AGER、PDGFB、iNOS、IL-6、IL-4、NF-kB、Keratin 10、TRPV4、KRT1、INV、Claudin 1、AQP3、DSG1和SIRT1。

4.根据权利要求1所述的检测芯片，其特征在于，所述检测玻片还固定有对照抗体，所述对照抗体为生物素标记的牛IgG。

5.权利要求1~4任一项所述的检测芯片在制备检测皮肤色素调控蛋白的产品中的应用。

6.权利要求1~4任一项所述的检测芯片的制备方法，其特征在于，将所述抗体与抗体稀释液混合后点样至检测玻片上，静置过夜，干燥，得到检测芯片。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述抗体稀释液为含有0.1~1 mg/mL牛血清白蛋白的PBS缓冲液；所述抗体的点样浓度为0.00002~0.02 ng/pl。

8.非疾病诊断和治疗目的产品色素调控性能的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

以权利要求2~3任一项所述的检测芯片检测样品中色素调控蛋白的表达水平，根据公式计算功效得分：

E= (Ka×Ma) + (Kb×Mb) + (Kc×Mc) +(Kd×Md)+ (Ke×Me)

其中：E为皮肤美白产品的功效得分；

K为权重系数，且Ka+ Kb+ Kc+ Kd+ Ke=1；

Ka为黑色素调控通路的权重系数、Kb为黄色素调控通路的权重系数、Kc为红色素调控通路的权重系数、Kd为皮肤免疫过敏通路的权重系数、Ke为皮肤屏障和保湿通路的权重系数；

M为各皮肤色素及皮肤相关安全通路的蛋白表达显著性评分的均值；M=(X₁+X₂+……+Xn)/n；X₁~ Xn为各靶点蛋白的表达显著性评分，n为靶点蛋白个数。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，其中：Ka=0.55、Kb=0.05、Kc=0.1、Kd=0.15、Ke=0.15；

与模型组相比，靶点荧光值的变化对于美白效果的提高存在积极意义，并且P＜0.001，则X=2分；

与模型组相比，靶点荧光值的变化对于美白效果的提高存在积极意义，且0.001＜P＜0.05，则X=1分；

与模型组相比，靶点荧光值无变化或靶点荧光值的变化与模型组相比无显著性差异，p≥0.05，则X=0分；

与模型组相比，靶点荧光值的变化对于美白效果的提高不存在积极意义，则X=0分。