[发明专利]氟化聚乙烯亚胺在制备疫苗或预防/治疗病毒/细菌引起的疾病的制剂中的应用

说明书

本发明涉及一种氟化聚乙烯亚胺在制备疫苗或预防/治疗病毒/细菌引起的疾病的制剂中的应用。本发明公开了氟化聚乙烯亚胺的新用途，为增强疫苗递送效率、增强抗原特异性免疫反应提供一种胞内递送体系，氟化聚乙烯亚胺可同时作为抗原载体并能发挥免疫佐剂的功能。

技术领域

本发明涉及生物制剂领域，尤其涉及一种氟化聚乙烯亚胺在制备疫苗或预防/治疗病毒/细菌引起的疾病的制剂中的应用。

背景技术

进入21世纪，随着肿瘤学、免疫学、细胞生物学、生物化学以及分子物学等学科的不断发展和交叉渗透，肿瘤免疫治疗的理论基础和临床研究都取得了迅猛的发展。迄今为止，肿瘤免疫治疗的方法包括肿瘤疫苗，免疫检查点(ICB)单抗和细胞免疫治疗等。其中，以嵌合抗原受体(CAR)T细胞为代表的细胞免疫治疗实现了90％的完全缓解率。以免疫检查点抗体为代表的免疫治疗在黑色素瘤、淋巴瘤、非小细胞肺癌中取得了良好的效果，并被美国食品和药物管理局(FDA)批准用于恶性黑色素瘤、肺癌、头颈癌、膀胱癌、肾癌和霍奇金淋巴瘤等多种肿瘤的临床治疗。尽管如此，肿瘤的免疫治疗领域仍然存在许多尚未解决的问题：如免疫治疗缺乏个体化疗效预测靶点；免疫治疗的主力军T淋巴细胞普遍存在活力下降、免疫耐受、功能耗竭等问题；部分患者在使用免疫治疗后出现“假阳性”和“假阳性”等临床相关现象；另外，CAR-T在杀灭肿瘤细胞的同时，可产生大量的炎性因子，引发细胞因子风暴等危及患者生命的问题，肿瘤免疫治疗法仍有待进一步改善。

肿瘤疫苗既能产生新的针对肿瘤细胞的抗原特异性T细胞反应，又能放大现有的反应，肿瘤疫苗可能是免疫检查点抑制疗法的有效联合伙伴。通过选择合适的抗原靶点，肿瘤疫苗可以诱导有效的肿瘤特异性免疫反应，同时将自身免疫降至最低。最近的研究表明，肿瘤新抗原(Neoantigen)是ACT、ICB和治疗性疫苗接种的关键靶点。此外，现有的肿瘤疫苗通常需要添加免疫佐剂增强抗原的免疫应答，但实现佐剂和抗原的同时空递送到同一个靶细胞(抗原呈递细胞)内的效率非常低。

激活免疫系统以预防和治疗感染和其他疾病的疫苗对人类医疗保健产生了重大影响。几十年来，人们一直在积极追求和研究癌症疫苗，现在市场上有几个成功的例子。然而，到目前为止，预防性癌症疫苗只对病毒相关的癌症有效，例如人类乳头瘤病毒诱导的宫颈癌。Provenge(Sipuleucel-T)是迄今为止FDA批准的唯一治疗型癌症疫苗，其对前列腺癌只有温和的临床治疗效果。与其他免疫疗法，例如免疫检查点阻断治疗法和过继T细胞疗法相比，大多数癌症疫苗未能显示出显著的临床疗效。

纳米技术和生物工程领域近些年的发展极大提高了肿瘤免疫治疗的安全性和疗效。与负载抗肿瘤药物靶向肿瘤部位直接杀伤肿瘤细胞不同，纳米生物载体负载免疫活性药物靶向免疫细胞，通过免疫治疗进而发挥抗肿瘤作用。纳米技术在抗肿瘤免疫治疗尤其在肿瘤疫苗领域具有以下优势：由于纳米载体的自身特性及淋巴器官的结构特点，纳米粒子容易富集于淋巴结、脾脏等淋巴器官中；具有靶向性的纳米载体可以将免疫激活药物例如抗原和佐剂递送给抗原呈递细胞；纳米载体可同时负载多种不同药物，在同一时空发挥作用，在抗原呈递、过程中具有无可替代的优势。因此，纳米技术在基于疫苗的抗肿瘤免疫治疗中具有广阔的应用前景，开发更多的基于纳米技术的疫苗十分必要。虽然一些纳米载体实现了对抗原和佐剂的装载和递送，但也存在一定缺陷：现有的纳米疫苗中，载体具有佐剂功能的纳米材料载体并不是很多。

此前，人们发现聚乙烯亚胺(PEI)具有刺激免疫反应的佐剂功能。PEI可以很显著刺激骨髓来源树突状细胞(BMDC)表面CD86和MHC-II的表达并在此过程中释放促炎细胞因子TNF-α和IL-6。研究者发现，在Tlr4敲除的小鼠体内，PEI杀伤肿瘤的免疫反应也有所下降。近些年，基于氟化修饰的阳离子高分子(如氟化聚乙烯亚胺)作为蛋白质胞内的递送载体，被应用于高效蛋白质递送。但是，鉴于肿瘤免疫治疗具有更高的要求，目前并未有关于将氟化聚乙烯亚胺(F-PEI)用于疫苗递送和免疫佐剂应用的相关报道。

发明内容