[发明专利]粗品多糖的纯化方法

权利要求书

1.一种粗品多糖的纯化方法，其特征在于：由以下步骤组成：

（1）阴离子交换纯化：将红曲霉粗品多糖用去离子水配成浓度为40-50mg/mL的多糖溶液，利用阴离子交换色谱柱对粗品多糖进行纯化，选用0.1mol/L的NaCl溶液为洗脱液，然后将洗脱液透析除盐、浓缩后冷冻干燥即得初步分离的多糖；

（2）凝胶柱层析：将初步分离的多糖配制成 70-80mg/mL 的样品溶液，上样至凝胶色谱柱，采用NH₄HCO₃溶液进行洗脱，洗脱液通过自动部分收集器收集，通过硫酸-苯酚法检测各管吸光度，以吸光度对洗脱体积绘制洗脱曲线，收集相应峰尖部分，反复加水减压干燥去除NH₄HCO₃，冷冻干燥后即得纯品多糖；

其中：

步骤（1）中所述的阴离子交换色谱柱的填料为Q-Sepharose Fast Flow；

步骤（1）中所述的阴离子交换色谱柱的工作条件：柱温为室温，进样量为不超过填料质量的0.04%；所述的透析除盐为于MwCO3500的透析袋中透析12-18h；

步骤（1）中冷冻干燥温度为-10℃至-50℃，干燥室真空度＜0.11MPa，干燥时间24-28h；通过步骤（1）得到分子量为3000-20000道尔顿的多糖的混合物；

步骤（2）中所述的NH₄HCO₃溶液的浓度为0.2mg/mL，流速为0.25mL/min；所述的凝胶色谱柱的填料为Sephadex S-100。

2.根据权利要求1所述的粗品多糖的纯化方法，其特征在于：步骤（2）中所述的凝胶色谱柱的工作条件：柱温为室温，进样量为不超过填料质量的0.04%。

3.根据权利要求1所述的粗品多糖的纯化方法，其特征在于：步骤（2）中所述的冷冻干燥温度为-10℃至-50℃，干燥室真空度＜0.11MPa，干燥时间24-28h。