[发明专利]聚乳酸-羟基乙酸碳酸钙微粒及其制备方法与应用

说明书

本发明涉及聚乳酸‑羟基乙酸碳酸钙微粒及其制备方法与应用，本发明的聚乳酸‑羟基乙酸碳酸钙微粒以聚乳酸‑羟基乙酸和聚乳酸‑羟基乙酸‑聚乙二醇为壳层，以碳酸钙为核层。本发明还公开了上述聚乳酸‑羟基乙酸碳酸钙微粒在制备肿瘤免疫治疗的佐剂中的应用。本发明的聚乳酸‑羟基乙酸碳酸钙微粒具有良好的调节肿瘤微酸环境的效果，能够增强肿瘤免疫治疗效果，可减少肿瘤中免疫抑制性细胞的含量，增加能够杀伤肿瘤的免疫细胞的含量，并促进肿瘤相关巨噬细胞由M2向M1型极化，有效扭转肿瘤免疫抑制微环境，激活抗肿瘤免疫，抑制肿瘤生长。

技术领域

本发明涉及肿瘤治疗制剂领域，尤其涉及一种聚乳酸-羟基乙酸碳酸钙微粒及其制备方法与应用。

背景技术

肿瘤免疫治疗是一种通过激活人体自身免疫系统来抑制肿瘤生长的治疗手段，其核心在于有效激活肿瘤患者体内的T淋巴细胞的抗肿瘤反应，实现对肿瘤生长的特异性抑制和杀灭。经过多年的发展，癌症免疫疗法主要可以分为免疫调节剂、免疫检查点阻断疗法、过继性免疫疗法和免疫疫苗四个方面。

免疫调节剂主要是指利用如白介素、干扰素、功能性多糖及多肽等活性成分产生非特异性的免疫调节用于提高机体的免疫功能，从而激活抗肿瘤免疫反应。免疫检查点阻断疗法是指通过阻断癌细胞和其对应的配型功能蛋白的结合来促进机体免疫细胞对肿瘤的识别，经典的免疫检查点通路有CTLA-4与CD80/CD86和PD-1与PD-L1/PD-L2。免疫检查点阻断疗法是激活治疗性抗肿瘤免疫最有前途的方法，在临床取得了较好的治疗效果。但是，目前仍面临着响应率较低的问题，限制了其临床应用。

目前，FDA已经批准了6种免疫检查点抑制剂用于治疗黑色素瘤、非小细胞肺癌、膀胱癌和霍奇金淋巴瘤等多种恶性肿瘤。近两年内，中国已经上市了5种PD-1药物，其中包含了三种国产抗体，分别为特瑞普利单抗、信迪利单抗及卡瑞利珠单抗。过继性细胞疗法主要是将供体的免疫细胞输送给患者，从而提高患者的免疫功能，有效杀死体内肿瘤。CAR-T是研究最为广泛的肿瘤免疫细胞疗法之一，通过在体外对患者的T细胞进行特异性地基因改造，赋予T细胞识别肿瘤细胞表面特定蛋白的能力，从而有效发现和杀伤癌细胞，经批量扩增后回输给病人。该细胞疗法能精准杀伤多种恶性肿瘤，治疗效果更佳持久。免疫疫苗是利用灭活的肿瘤细胞或抗原物质刺激机体产生特异性细胞免疫和体液免疫，有效地预防肿瘤的扩散和复发。

由于肿瘤细胞的快速增殖、代谢途径改变、肿瘤血管发育畸形等原因，实体肿瘤常有着乏氧、微酸、间隙压高、高活性氧、免疫耐受等一系列与正常组织不同的微环境特征。其中，肿瘤微酸不但可以通过降低T细胞分泌IFN-β和TNF-α等效应性细胞因子、并诱导T淋巴细胞凋亡等途径来抑制机体的抗肿瘤免疫功能，还会导致抗体降解与失活，进而对基于anti-PD-1/PD-L1等免疫检查点阻断疗法的疗效产生负面影响。

尽管激活机体免疫功能来消灭癌细胞有着广阔的前景，然而传统免疫疗法在治疗时也暴露出了许多与过度免疫相关的毒副作用，如免疫检查点抑制剂的响应度较低，仅对部分病人有效。使用免疫疗法容易产生细胞因子风暴，破坏机体的稳态，使得过度活化的免疫细胞攻击机体正常的细胞和器官，严重威胁病人的生命。如何在提高肿瘤免疫治疗效果的同时减小毒副作用是未来免疫疗法的发展重点之一。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明的目的是提供一种聚乳酸-羟基乙酸碳酸钙微粒及其制备方法与应用，本发明的聚乳酸-羟基乙酸碳酸钙微粒具有良好的调节肿瘤微酸环境的效果，能够增强肿瘤免疫治疗效果，可减少肿瘤中免疫抑制性细胞的含量，增加能够杀伤肿瘤的免疫细胞的含量，并促进肿瘤相关巨噬细胞由M2向M1型极化，有效扭转肿瘤免疫抑制微环境，激活肿瘤免疫，抑制肿瘤生长。

本发明提供了一种聚乳酸-羟基乙酸碳酸钙微粒(CaCO₃@PLGA-PEG)，其以聚乳酸-羟基乙酸(PLGA)和聚乳酸-羟基乙酸-聚乙二醇(PLGA-PEG)为壳层，以碳酸钙(CaCO₃)为核层。

进一步地，聚乳酸-羟基乙酸碳酸钙微粒粒径为100～120nm。