[发明专利]一种以商品化磁珠为内标的比率免疫分析方法有效
申请号: | 202010971675.6 | 申请日: | 2020-09-16 |
公开(公告)号: | CN114200137B | 公开(公告)日: | 2023-09-01 |
发明(设计)人: | 吕弋;王超群;刘睿 | 申请(专利权)人: | 四川大学 |
主分类号: | G01N33/574 | 分类号: | G01N33/574;G01N33/543;G01N33/553;G01N27/62 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 610065 四川*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 商品化 标的 比率 免疫 分析 方法 | ||
1.一种以商品化磁珠为内标的比率免疫分析方法,特征在于:
(1)以商业化的磁性微球中Fe元素作为内标,金纳米颗粒作为报告探针;采用高分辨电感耦合等离子体质谱同时采集磁珠内的57Fe信号及报告探针中的197Au信号,计算197Au/57Fe信号比值,实现对CEA的准确定量分析;
(2)所述的比率免疫分析方法,利用链霉亲和素与生物素的特异性结合,使抗体与商业化磁性微球偶联;当CEA存在时,加入一定倍数稀释的Ab2-AuNPs,反应形成三明治结构;磁性分离洗涤后,用王水消解,最后溶液被稀释至一定体积;采用高分辨电感耦合等离子体质谱采集溶液中的197Au与 57Fe的信号强度,并计算其比值,实现对CEA的准确定量分析;
(3)所述Ab2-AuNPs采用BSA封闭;
(4)所述反应的温度为37℃;
(5)所述的Ab2-AuNPs稀释倍数为0.5-10倍;
(6)磁性分离洗涤后得到磁珠复合物,所述磁珠复合物与50 μL王水反应20 min后,用超纯水稀释溶液至8 mL。
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