[发明专利]一种基于AdEasyTM 有效
申请号: | 202010974584.8 | 申请日: | 2020-09-16 |
公开(公告)号: | CN112143756B | 公开(公告)日: | 2022-07-01 |
发明(设计)人: | 周明光;邵伟;汤细彪;徐高原;曾小燕;郝根喜;金建云;陈章表 | 申请(专利权)人: | 武汉科前生物股份有限公司 |
主分类号: | C12N15/861 | 分类号: | C12N15/861;C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11;C12N15/64;C12N15/65;C12N1/02;G01N21/64 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 钱云 |
地址: | 430206 湖北省武*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 adeasy base sup tm | ||
1.一种基于AdEasyTM系统的高效重组腺病毒载体,其特征在于,所述高效重组腺病毒载体为含有prrn基因的穿梭载体pShuttle-IRES-hrGFP-1,所述prrn基因为如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。
2.根据权利要求1所述的高效重组腺病毒载体,其特征在于,所述prrn基因位于所述穿梭载体pShuttle-IRES-hrGFP-1中IRES和hrGFP之间。
3.用于鉴定权利要求1或2所述高效重组腺病毒载体的引物对,其特征在于,所述引物对包括如下核苷酸序列的引物:
prrn-F:5’-GCCACAACCATGGTGGCTCCCCCGCCGTCGTTCAATGAGA-3’,
prrn-R:5’-TTAAATCTAGAGAGTCGACCGGCATGGACGAGCTGTACAA-3’。
4.权利要求1或2所述高效重组腺病毒载体的制备方法,其特征在于,包括:
获得prrn基因的基因片段,通过同源重组将所述prrn基因的基因片段构建至穿梭载体pShuttle-IRES-hrGFP-1中;所述prrn基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
5.含有权利要求1或2所述高效重组腺病毒载体的生物材料,其特征在于,所述生物材料为质粒、转基因细胞或试剂盒。
6.一种筛选含有目的蛋白的腺病毒重组子的方法,其特征在于,包括:通过将所述目的蛋白的编码基因构建至权利要求1或2所述高效重组腺病毒载体进行所述目的蛋白的表达,在腺病毒重组子的筛选过程中选择发绿光且不抗氨苄的菌落。
7.一种腺病毒表达系统,其特征在于,所述腺病毒表达系统通过权利要求6所述方法进行含有目的蛋白的腺病毒重组子的筛选。
8.权利要求1或2所述的高效重组腺病毒载体在快速筛选腺病毒重组子中的应用。
9.权利要求1或2所述的高效重组腺病毒载体或权利要求7所述腺病毒表达系统在重组蛋白的表达中的应用。
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