[发明专利]一种海产品中蓝细菌毒素含量检测系统

权利要求书

1.一种海产品中蓝细菌毒素含量检测系统，其特征在于，所述海产品中蓝细菌毒素含量检测系统包括：

体积采集模块、功率采集模块、重量采集模块、中央控制模块、粉碎模块、浸泡模块、提取模块、DNA浓度检测模块、毒素产量测定模块、计算模块、显示模块；

体积采集模块，与中央控制模块连接，用于通过体积测量器采集原料体积；

功率采集模块，与中央控制模块连接，用于通过功率检测器采集超声设备功率数据；

重量采集模块，与中央控制模块连接，用于通过称重器采集原料重量数据；

中央控制模块，与体积采集模块、功率采集模块、重量采集模块、粉碎模块、浸泡模块、提取模块、DNA浓度检测模块、毒素产量测定模块、计算模块、显示模块连接，用于通过主机控制各个模块正常工作；

粉碎模块，与中央控制模块连接，用于通过粉碎机将海产品样品进行粉碎；

浸泡模块，与中央控制模块连接，用于通过称重器称取0.20g粉末加入正丁醇1ml、甲醇4ml、水15ml进行混合并浸泡10min；

提取模块，与中央控制模块连接，用于通过超声设备波功率为200W，超声10min，12000r/min离心12min，移取上层清液，沉淀用同前的条件再抽提两次，合并上清液，40℃以下减压浓缩至5mL，获得提取液；

DNA浓度检测模块，与中央控制模块连接，用于通过NanoDropND-100分光光度计在260nm波长下检测提取液中蛋白的DNA浓度；

毒素产量测定模块，与中央控制模块连接，用于测定蓝细菌毒素产量；

计算模块，与中央控制模块连接，用于通过计算程序建立蓝藻细胞中的DNA含量与其胞内蓝细菌毒素含量之间的线性关系，并计算线性方程，根据该线性方程实现通过DNA定量获得蓝细菌毒素含量测定；

显示模块，与中央控制模块连接，用于通过显示器显示原料体积、重量、超声设备功率及DNA浓度、测定结果、计算结果。

2.如权利要求1所述海产品中蓝细菌毒素含量检测系统，其特征在于，所述DNA浓度检测模块检测方法如下：

(1)将海产品蓝细菌置于Bg-11培养基中，在46℃的温度以及70μmol·m^-2·s^-1的光照强度下培养15d，获得菌液；

(2)在培养期间每天监测OD730nm的生长情况，确定OD730nm为1时对应的菌液作为提取液；将所述提取液进行一次离心处理，去除第一上清液，获得细胞沉淀物；

(3)将所述细胞沉淀物置于PBS缓冲液中重悬，并过夜冻存，室温解冻后进行二次离心处理，保留第二上清液；其中，所述第二上清液中包括蛋白；通过NanoDropND-100分光光度计在260nm波长下检测提取液中蛋白的DNA浓度。

3.如权利要求2所述海产品中蓝细菌毒素含量检测系统，其特征在于，所述Bg-11培养基处理方法：

(1.1)通过搅拌器将Bg-11培养基和0.3mol·L^-1水溶性碳酸氢盐溶液进行混合搅拌。

4.如权利要求3所述海产品中蓝细菌毒素含量检测系统，其特征在于，所述水溶性碳酸氢盐溶液为碳酸氢钠溶液。

5.如权利要求2所述海产品中蓝细菌毒素含量检测系统，其特征在于，所述一次离心处理的时间为8min。

6.如权利要求2所述海产品中蓝细菌毒素含量检测系统，其特征在于，所述PBS缓冲液的用量为10mL。

7.如权利要求1所述海产品中蓝细菌毒素含量检测系统，其特征在于，所述毒素产量测定模块测定方法如下：

1)蓝细菌毒素用SiliaPrepC18SPE小柱进行提取；

2)溶出的MC-甲醇溶液通过旋转蒸发仪蒸发至微量，甲醇定容至1ml，将定容后的样品用0.22μm的水系玻璃纤维滤膜过滤，滤液装入液相瓶，采用HPLC法实现蓝细菌毒素产量的测定；蓝细菌毒素检测的色谱条件为：色谱柱温度：30℃，流动相：甲醇：水＝80:20，水中含0.1％TFA，流速：1ml/min，检测器：紫外可见光检测器波长238nm。

8.如权利要求7所述海产品中蓝细菌毒素含量检测系统，其特征在于，所述蓝细菌毒素用SiliaPrepC18SPE小柱进行提取方法：

1.1)将样品经过用10ml甲醇和20ml水预先活化的小柱进行富集，然后用20ml水及20ml10％和20％的甲醇分别进行洗涤；

1.2)再用10ml甲醇将蓝细菌毒素进行洗脱。