[发明专利]一种致病性弧菌噬菌体VmYZU10474及其应用

说明书

本发明公开了一种致病性弧菌噬菌体VmYZU10474及其应用，该噬菌体经鉴定具有独特的基因组结构特征，属于一种新型噬菌体，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏时间为2020年8月12日，保藏编号为CCTCC NO：M 2020417。本发明获得高效裂解弧菌的噬菌体，能够抑制各种基质中的致病性弧菌，如拟态弧菌、副溶血性弧菌、溶藻弧菌、河流弧菌等，可以应用于制备控制水产品及其环境中致病性弧菌污染的抑菌剂。本发明制备的抑菌剂能够在培养基、鱼汁、水产样品中有效控制致病性弧菌的生长，同时可以有效抑制设备、器皿等固体上致病性弧菌菌膜形成，并且制备简单，使用方便，可降低致病性弧菌传播和引发食源性疾病的风险。

技术领域

本发明属于生物工程领域，具体涉及一种致病性弧菌噬菌体VmYZU10474及其作为抑菌剂在水产品及其暂养、贮藏环境中和设备中的抑菌应用。

背景技术

水产品因其味道鲜美和高营养价值深受广大消费者的青睐，随着人们对水产品需求的日益增加，水产品养殖业呈现飞速发展之势，据联合国粮农组织(FAO)估计，到2020年全球的海产品供应将有一半来自水产养殖业。然而，由于高密度水产养殖模式引发的细菌性疾病已经成为水产养殖业面临的重要问题之一。

弧菌是水产养殖中最为常见、分布最广、危害最为严重的细菌性病原之一，弧菌是一群菌体短小、杆状或弯曲成弧状的革兰氏阴性菌，广泛分布在自然界中，以海洋、河口和淡水系统中水生动物体内寄生居多，随着水产养殖业的发展，弧菌病的爆发越来越频繁，传播速度加快，给世界水产养殖业带来了巨大的经济损失。弧菌属由14个分支中的100多种组成，随着多位点序列分析、荧光扩增片段长度多态性等细菌分类学新技术的引入，不断有新弧菌属物种被发现。目前已知有12种弧菌与人类肠内、肠外感染有关，近年来流行病学调查结果显示致病性弧菌是我国沿海沿江城市人群腹泻病的主要病原菌，其中危害最大、最常见的是副溶血弧菌、霍乱弧菌、创伤弧菌、溶藻弧菌和拟态弧菌，其中O1型霍乱弧菌被WHO确定为检疫菌，霍乱弧菌和副溶血弧菌都是也是国际水产品的检测菌种。筛选廉价且环境友好的新型生物抗菌剂，减除动物养殖环境、食品加工与贮藏环境以及食品原料中拟态弧菌污染，对于控制该菌引起的疾病具有十分重要的意义。

目前水产养殖业主要应用抗生素等来抑制致病性弧菌的生长，然而滥用抗生素导致的细菌耐药性和超级细菌已成为全球最紧迫的公共卫生问题之一。虽然在食品生产环境中可用化学杀菌剂来控制细菌的生长，但化学杀菌剂残留对人畜安全和环境具有重要影响。致病性弧菌在适应自然环境生长过程中，极易在食品、加工器具的表面形成生物被膜，被膜内的细菌对常规保鲜剂、抑菌剂的抵抗能力可以提高数百倍，很难被清除，从而导致持续性污染，给水产食品安全带来严重危害。因此，亟需开发天然无害的生物抑菌剂替代抗生素及常规化学抑菌剂应用于养殖水体净化及水产食品安全控制。

噬菌体广泛存在于自然界中，对宿主具有专一性，对人畜机体无害，并且资源丰富、制备成本低廉，安全环保。近年来，新型噬菌体抑菌剂研发已受到广泛关注，世界各国在噬菌体资源、生物学特性以及在各种基质中的控菌方面开展了大量研究，在美国和欧洲国家已经形成沙门氏菌、李斯特菌等病原菌的商品化生物抑菌剂，在控制水产生物及生产环境中的病原菌感染传播中具有高效、廉价、安全等优势。国内外对致病性弧菌噬菌体的研究虽有不少报道，但高效、宽谱的致病性弧菌噬菌体报道较少。

发明内容

发明目的：针对现有技术存在的问题，本发明提供一种对多种致病性弧菌具有强裂解作用的噬菌体，该噬菌体可以用于控制水产品及生产环境中致病性弧菌污染。

本发明还提供所述噬菌体在制备致病性弧菌及其生物膜抑制剂中的应用。该噬菌体可单独或复配成抑菌剂，用于控制水产品暂养和生产环境中致病性弧菌的生长及其生物被膜的形成，为水生动物和食品清洁生产提供一种安全、高效、廉价的生物抗菌产品。