[发明专利]高度仿生活性骨组织的负载干细胞的可注射骨修复粘合剂及其制备方法

权利要求书

1.高度仿生活性骨组织的负载干细胞的可注射骨修复粘合剂，其特征在于，该骨修复粘合剂由具有多重杂化交联网络结构的水凝胶以及分布在具有多重杂化交联网络结构的水凝胶中的干细胞组成；该骨修复粘合剂在冷冻干燥后具有互穿网络结构，平均孔径为200～500μm、孔隙率为60％～90％；该骨修复粘合剂对颅骨的组织粘附力至少为16KPa；

具有多重杂化交联网络结构的水凝胶是具有羧基及儿茶酚官能团的高分子材料的溶液、具有氨基及羧基的高分子材料的溶液与微米级球形羟基磷灰石浆料反应形成的，具有羧基及儿茶酚官能团的高分子材料氧化自交联、具有羧基及儿茶酚官能团的高分子材料与具有氨基及羧基的高分子材料通过迈克加成反应，具有羧基及儿茶酚官能团的高分子材料上的酚羟基与从微米级球形羟基磷灰石中游离出的钙离子螯合形成了多重杂化交联网络结构，微米级球形羟基磷灰石均匀分布于多重杂化交联网络结构中；所述微米级球形羟基磷灰石的粒径为5～50μm；

所述具有氨基及羧基的高分子材料是I型胶原，所述具有羧基及儿茶酚官能团的高分子材料是结构式如式(Ⅰ)所示的多巴胺改性的透明质酸，多巴胺改性的透明质酸中多巴胺的接枝率为1％～50％，

具有多重杂化交联网络结构的水凝胶是在pH＝6.5～7.5的条件下，多巴胺改性的透明质酸溶液、I型胶原溶液与微米级球形羟基磷灰石浆料反应形成的，多巴胺改性的透明质酸氧化自交联、多巴胺改性的透明质酸与I型胶原通过迈克加成反应，多巴胺改性的透明质酸上的酚羟基与从微米级球形羟基磷灰石中游离出的钙离子螯合形成了多重杂化交联网络结构，微米级球形羟基磷灰石均匀分布于多重杂化交联网络结构中；

该骨修复粘合剂的制备方法包括以下步骤：

将具有羧基及儿茶酚官能团的高分子材料溶解，在冰浴条件下加入微米级球形羟基磷灰石浆料并充分超声分散，然后滴加具有氨基及羧基的高分子材料的溶液，充分超声分散，调节所得混合液的pH值至6.5～7.5，然后加入pH值为6.5～7.5的干细胞混悬液，搅拌混匀，再立即转移至模具中在37℃静置至各组分充分交联和络合并转变为凝胶状态，即得可注射骨修复粘合剂；所述微米级球形羟基磷灰石浆料的固含量为5wt.％～45wt.％。

2.根据权利要求1所述高度仿生活性骨组织的负载干细胞的可注射骨修复粘合剂，其特征在于，该可注射骨修复粘合剂的含水量为20％～80％；在冷冻干燥状态下，微米级球形羟基磷灰石的含量为15wt.％～80wt.％。

3.根据权利要求2所述高度仿生活性骨组织的负载干细胞的可注射骨修复粘合剂，其特征在于，在具有羧基及儿茶酚官能团的高分子材料氧化自交联、具有羧基及儿茶酚官能团的高分子材料与具有氨基及羧基的高分子材料通过迈克加成反应，具有羧基及儿茶酚官能团的高分子材料上的酚羟基与从微米级球形羟基磷灰石中游离出的钙离子螯合形成了多重杂化交联网络结构中，具有氨基及羧基的高分子材料的含量为50wt.％～80wt.％。

4.根据权利要求1所述高度仿生活性骨组织的负载干细胞的可注射骨修复粘合剂，其特征在于，微米级球形羟基磷灰石浆料的加入量应使微米级球形羟基磷灰石的质量占具有氨基及羧基的高分子材料、具有羧基及儿茶酚官能团的高分子材料以及微米级球形羟基磷灰石总质量的15％～80％。

5.根据权利要求4所述高度仿生活性骨组织的负载干细胞的可注射骨修复粘合剂，其特征在于，具有氨基及羧基的高分子材料的溶液的加入量应使具有氨基及羧基的高分子材料的质量占具有氨基及羧基的高分子材料和具有羧基及儿茶酚官能团的高分子材料的总质量的50％～80％。

6.根据权利要求1所述高度仿生活性骨组织的负载干细胞的可注射骨修复粘合剂，其特征在于，将具有羧基及儿茶酚官能团的高分子材料用水溶解形成浓度为5～50mg/mL的具有羧基及儿茶酚官能团的高分子材料的溶液，将具有氨基及羧基的高分子材料用醋酸溶液溶解形成浓度为3～50mg/mL的具有氨基及羧基的高分子材料的溶液。