[发明专利]一种有机氯农药污染土壤修复菌剂的制备工艺

权利要求书

1.一种有机氯农药污染土壤修复菌剂的制备工艺，其具体制备方案如下：

步骤一，微生物的扩陪，将优选根瘤菌、固氮菌、解磷菌、解钾菌、木霉和芽孢杆菌分别接种到2-5份的液体培养基中，在26-30℃，100-150rpm条件下避光培养18-36h；所述的液体培养基按照质量份数包括0.8％-1.6％的蛋白胨，0.05％-0.1％的酵母粉，0.9％-1.5％的氯化钠，1.5％-2.5％的琼脂；

步骤二，填料的处理，将80-120份的麦麸和50-80份的玉米秸秆粒混合均匀后加入到发酵罐中，所述的发酵罐经过5-10min的蒸汽杀菌，然后将填料用蒸汽杀菌处理20-30min，完成后冷却到室温；

步骤三，将全部的扩陪的微生物培养基加入到发酵罐中，控温26-32℃，发酵培养7-10天，发酵过程中发酵罐中鼓入空气，0.5-1.2L/min，曝气发酵，完成后将填料干燥，加入5-8份修复增效剂，混合均匀，低温保存，即可得到所述的一种环保型土壤修复菌剂。

2.根据权利要求1所述的一种有机氯农药污染土壤修复菌剂的制备工艺，其特征在于：所述的优选根瘤菌，其选培方法如下：

按照质量份数，将0.1-0.5份的大豆根瘤用水清洗干净，然后在80％-90％的乙醇中浸泡5-10min，完成后在质量份数为0.01％-0.1％的升汞溶液中，浸泡1-5min，完成后用无菌清水冲洗干净，然后经大豆根瘤在灭菌后的粉碎机中粉碎，将粉碎物接种到培养基中，在28-32℃下避光培养24-36h，挑选纯化菌落放入到含有乙草胺浓度为150-200mg/L的基础盐培养基中，在28-32℃、120-150rpm避光培养5-8d，以5％-10％的接种量连续富集，按同样的方法转接3-7次，即可培养出所述的优选根瘤菌；所述的基础盐培养基中包括：45-55ppm的氢氧化钙，25-38ppm的硼酸，8-12ppm的硫酸锌，3-7ppm的硫酸锰，10-50ppm的氯化钠，1-5ppm的硫酸铁。

3.根据权利要求1所述的一种有机氯农药污染土壤修复菌剂的制备工艺，其特征在于：所述的蒸汽温度为120-140℃。

4.根据权利要求1所述的一种有机氯农药污染土壤修复菌剂的制备工艺，其特征在于：所述的液体培养基经过110-120℃灭菌处理20-30min。

5.根据权利要求1所述的一种有机氯农药污染土壤修复菌剂的制备工艺，其特征在于：所述的发酵罐中鼓入空气经过精密过滤除菌处理。

6.根据权利要求1所述的一种有机氯农药污染土壤修复菌剂的制备工艺，其特征在于：所述的低温保存温度为2-8℃。

7.根据权利要求1所述的一种有机氯农药污染土壤修复菌剂的制备工艺，其特征在于：所述的修复增效剂的制备方法为：

步骤一：按质量份，在高压反应釜中，通入氮气，将40-65份甘蔗渣纤维浸入到300-400份质量百分比含量为5％-9％的氢氧化钠溶液中，加热到60-70℃，处理100-180min，过滤，将甘蔗渣纤维清洗干净，再加入200-230份质量百分比含量为12-17％的硝酸水溶液，控温80-100℃，搅拌反应4-7h，过滤，烘干，得到含羧基的甘蔗渣纤维，

步骤二：再加入10-20份异甘露糖醇，2-5份氢化松油醇，10-16份质量百分比含量14-20％氢氧化钾水溶液，在180℃-200℃保温反应5-12h，降温至室温，加入12-19份质量百分比含量14-20％氢氧化钾水溶液，105-110℃抽真空脱水，经检测混合物的含水量为小于0.01％，升温至140-150℃，开始通环氧乙烷180-220份,逐渐升温至180-200℃继续反应1-4h，在110-120℃下脱水2-5h，即得到修复增效剂。