[发明专利]USP14在肝细胞肝癌诊断、预后判断以及治疗中的应用

说明书

本发明属于生物医药技术领域，尤其是涉及USP14在肝细胞肝癌分子诊断、预后判断及药物与基因治疗的应用。本发明提供了一种与肝癌发生发展相关的分子标志物USP14和一种肝癌癌的诊断产品和手段，通过检测分子标志物的表达水平来判断患者是否患有肝癌的风险。并且提供一种治疗肝癌的药物组合或方法，通过特异性的下调分子标志物来治疗肝癌。实验表明采用基因手段下调USP14表达，能抑制裸鼠体内肝癌细胞的增殖。USP14抑制剂能达到与基因技术一样的肝癌抑制作用，且二者联合应用具有协同抗癌效果。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，尤其是涉及USP14在肝细胞肝癌分子诊断、预后判断及药物与基因治疗的应用。

背景技术

我国是原发性肝癌(Hepatocellular carcinoma，HCC)大国，新发病例和死亡病例占全世界一半以上。由于HCC起病隐匿，早期诊断困难，大部分患者就诊时已进展至晚期，即使手术治疗，术后5年内复发率仍高达40％-60％。因此，深入研究HCC发生发展的分子机制并积极探索有效的治疗措施已成为HCC诊断和治疗亟待解决的问题。缺氧是包括HCC在内实体肿瘤微环境最重要的特征，可介导肿瘤增殖、转移、血管生成等恶性生物学行为并导致患者预后不良。研究发现应用Sorafenib(FDA批准HCC一线用药)能进一步加剧肿瘤内部缺氧，可能是HCC产生Sorafenib治疗抵抗的重要原因。HIF1-α作为重要的氧调节因子，与HCC病人预后及耐药关系密切。因此，发现新的影响HCC低氧环境下生物学行为及调控HIF1-1a功能的新的分子意义重大。

去泛素化酶USP14(ubiquitin specific processing enzyme 14，USP14)属于泛素特异性蛋白酶家族(USPs)，是该家族中唯一一个与26S蛋白酶体复合物相互作用的蛋白酶，它通过与蛋白酶体19S调节颗粒中的Rpn1可逆性结合，极大地增强了其去泛素化作用。近些年来研究表明USP14在实体瘤中可能是重要的促癌因子，抑制USP14的功能能延长荷瘤动物模型的生存期。然而，USP14在肝细胞肝癌中的生物学功能及作用机制尚不明确。

发明内容

鉴于现有技术存在的问题，本发明的目的在于提供USP14在肝细胞肝癌诊断、预后判断以及治疗中的应用。本发明提供了一种与肝癌发生发展相关的分子标志物USP14和一种肝癌的诊断产品和手段，通过检测分子标志物的表达水平来判断患者是否患有肝癌的风险。并且提供一种治疗肝癌的药物组合或方法，通过特异性的下调分子标志物来治疗肝癌。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案。

检测USP14表达的试剂在制备诊断和/或预后判断肝癌的产品中的应用。

进一步地，所述试剂选自：特异性识别USP14的探针；或特异性扩增USP14的引物。

进一步地，所述的特异性扩增USP14的引物序列如SEQ ID NO.1-SEQ IDNO.2所示。

进一步地，所述产品所述产品包括通过测序技术、核酸杂交技术、核酸扩增技术检测样本中USP14的表达水平的试剂，所述产品包括但不限于试剂、试剂盒、芯片、试纸、高通量测序平台。

USP14抑制剂在制备预防或治疗肝癌的药物及药物组合物中的应用。

进一步地，所述药物组合物包括USP14抑制剂。

进一步地，所述抑制剂选自：以USP14或其转录本为靶序列、且能够抑制USP14表达或转录的干扰分子，包括：shRNA、小干扰RNA、dsRNA、微小RNA、反义核酸，或能表达或形成所述shRNA、小干扰RNA、dsRNA、微小RNA、反义核酸的构建物。

优选的，所述shRNA序列如SEQID NO.1-SEQ ID NO.2所示。

进一步，所述药物组合物还包括与所述抑制剂配伍的其他药类以及药学上可接受的载体和/或辅料。