[发明专利]一种利用类球红细菌发酵生产辅酶Q10的培养基和培养方法

权利要求书

1.一种利用类球红细菌发酵生产辅酶Q10的培养基,其特征在于包括一级种子培养基、二级种子培养基和发酵培养基，其中

所述一级种子培养基的组成为：

糖蜜发酵液20～24kg/m³、一级花生粕19～23kg/m³、苜蓿粉8～12kg/m³、DDGS 13～17kg/m³、硫酸铵0.4～0.8kg/m³、轻质碳酸钙1～3kg/m³；

所述二级种子培养基的组成为：

糖蜜发酵液22～26kg/m³、一级花生粕21～25kg/m³、苜蓿粉10～14kg/m³、DDGS 15～19kg/m³、蚕蛹蛋白7～11kg/m³、硫酸铵0.5～0.9kg/m³、轻质碳酸钙1～3kg/m³；

所述发酵培养基的组成为：

糖蜜发酵液41～45kg/m³、一级花生粕22～26kg/m³、苜蓿粉11～15kg/m³、DDGS 16～20kg/m³、蚕蛹蛋白9～13kg/m³、硫酸铵0.5～0.9kg/m³、轻质碳酸钙1～5kg/m³、磷酸二氢钾0.04～0.08kg/m³、硫酸镁0.02～0.06kg/m³、硫酸亚铁0.08～0.12kg/m³、氯化钴0.01～0.03kg/m³、炔二醇改性表面活性剂3～7L/m³。

2.一种利用权利要求1所述的培养基发酵生产辅酶Q10的培养方法，其特征在于工艺步骤为：

1）一级种子培养：首先将一级种子培养基灭菌并冷却至室温，pH控制在6.0～6.8，并用无菌空气保压，然后在火焰保护下，将已经培养好的类球红细菌摇瓶液接入一级种子培养基中进行一级种子培养，OD值至3～4时移种；

2）二级种子培养：首先将二级种子培养基灭菌并冷却至室温，pH控制在6.0～6.8，并用无菌空气保压，将已经培养好的一级种子培养基移入二级种子培养基中进行二级种子培养，OD值）至3～4时移种，移入发酵培养基；

3）发酵培养：先将发酵培养基灭菌，冷却至室温，pH控制在6.4～6.6，并用无菌空气保压，然后将培养好的二级种子液移入发酵培养基进行发酵培养，至发酵单位＞3500mg/L时终止发酵。

3.按照权利要求2所述的培养方法，其特征在于所述一级种子培养条件为：

罐压0.02～0.06MPa；罐温31～32℃；搅拌转速：120～140r/min；空气流速：100～200m³/h。

4.按照权利要求2所述的培养方法，其特征在于所述二级种子培养条件为：

罐压0.02～0.06MPa；罐温31～32℃；空气流量200～400m³/h；搅拌转速120～140r/min。

5.按照权利要求2所述的培养方法，其特征在于所述发酵培养条件为：

a pH：发酵过程中pH控制在6.2～6.6；

b 温度：培养温度31～32℃；

c 搅拌转速：140～160r/min；

d 压力控制：罐压0.02～0.06MPa；

e 空气流量：600～800m³/h；

f 溶氧控制：

发酵前20h内，不控制溶氧，

发酵时间20h～发酵结束：溶氧控制在20%以上。

6.按照权利要求3所述的培养方法，其特征在于所述发酵过程中采用流加法进行补料，补料包括补水、补硫酸铵、补糖蜜发酵液和补磷，其中

a补水工艺控制：

发酵过程中，发酵液体积低于发酵罐有效容积的65%时，加入灭菌水，至发酵液体积为70%时，停止补水；

b 补磷工艺：

发酵时间在4～28h，若补入3-5%磷酸二氢钾溶液，补入量控制在7-8L/h，

发酵时间在42～80h，若补入3-5%磷酸二氢钾溶液，补入量控制在4-5L/h；

c 补入糖蜜发酵液：

发酵时间在0～48h，当总糖含量＜0.8%时，补入已灭菌的糖蜜发酵液，使总糖的含量控制在0.8～1.5%，

发酵时间在48～80h，当总糖含量＜0.5%时，补入已灭菌的糖蜜发酵液，使总糖的含量控制在0.5～0.8%，

d 补硫酸铵：

发酵时间在48～80h，发酵液中氨氮含量＜0.2%时，补入已灭菌的20～30%硫酸铵溶液，使氨氮的含量控制在0.4～0.5%。