[发明专利]一种高效抗体粉的制备方法在审
申请号: | 202010993044.4 | 申请日: | 2020-09-21 |
公开(公告)号: | CN112048533A | 公开(公告)日: | 2020-12-08 |
发明(设计)人: | 杜新永;李先胜;赵丹丹;罗成盛;张庆;刘玉庆;盖春云;马如霞;刘爽 | 申请(专利权)人: | 青岛润达生物科技有限公司 |
主分类号: | C12P21/00 | 分类号: | C12P21/00;C07K16/00;C12R1/645 |
代理公司: | 北京汇信合知识产权代理有限公司 11335 | 代理人: | 周文 |
地址: | 266221 山东省青*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 高效 抗体 制备 方法 | ||
1.一种高效抗体粉的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1 制备抗体蛋液:
S11 通过鸡胚扩增获得大量腺病毒,并对其进行灭活,制备待免疫鸡只的腺病毒疫苗;
S12 选取200多日龄的母鸡用腺病毒疫苗进行免疫,第一次免疫注射疫苗剂量为0.5ml,期间间隔半月,进行第二次注射0.3ml,之后间隔十天进行第三次注射疫苗0.3ml,此时检测鸡蛋效价值,效价值较高且稳定时收集高效价鸡蛋;
S13先用消毒剂进行鸡蛋表面消毒,后用打蛋器对鸡蛋进行破碎,收集整蛋液(蛋清与蛋黄混合液),加蛋液体积三分之一比例的水,搅拌均匀,用筛子对其进行过滤获得整蛋液,备用;
S2 制备红法夫酵母种子液:
S21 红法夫酵母菌种发酵前活化:将法夫红酵母种子在固体培养基中活化三次,活化温度为26℃活化时间为42小时,获得纯化的菌株,然后将菌株接种到固体培养基中,固体培养基如下质量百分含量的组分组成:马铃薯浸粉0.6%、葡萄糖2%、琼脂2%,在26℃的恒温培养箱中培养48小时,备用;
S22红法夫酵母种子液制备:将培养后的红法夫酵母菌株,接种在种子液培养基中,初始pH值5.0,培养温度为26℃,摇床转速为180rpm/min,培养52小时,得到红法夫酵母种子液;
其中种子液培养基采用如下质量百分含量的组分组成:葡萄糖2%,酵母浸膏0.3%,蛋白胨0.8%,氯化钠0.15%,磷酸二氢钾0.2%;
S3 将步骤S1制备得到的抗体蛋液以7%的比例接种步骤S2制备得到的红法夫酵母种子液,然后将待发酵的抗体蛋液放于摇床中,150rpm/min培养2天,培养温度28℃,培养结束后添加5%比例的可溶性淀粉,对其进行喷干处理,流速180ml/h,即得高效抗体粉。
2.根据权利要求1所述的一种高效抗体粉的制备方法,其特征在于,步骤S13中消毒剂的成分为100ppm的次氯酸钠溶液。
3.根据权利要求1所述的一种高效抗体粉的制备方法,其特征在于,步骤S13中筛子的目数为60-80目。
4.根据权利要求1所述的一种高效抗体粉的制备方法,其特征在于,步骤S3中喷干温度140℃。
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