[发明专利]一种增强造血干细胞移植能力的方法

说明书

本发明公开一种增强造血干细胞移植能力的方法，通过采用JNK抑制剂上调造血干细胞CCN3基因的表达增强造血干细胞移植能力。本发明方法作用机制明确，且能有效获得移植能力强的造血干细胞，从而有效解决移植物来源的造血干细胞数量不足的问题。

技术领域

本发明涉及造血干细胞技术领域，具体涉及一种增强造血干细胞移植能力的方法。

背景技术

造血干细胞(hematopoietic stem cell,缩写为HSC)是一类具有高度自我更新和多世系分化潜能的成体干细胞，临床可用于治疗恶性和非恶性血液疾病。但是由于HSC数量有限，导致大部分亟需HSC移植治疗的患者只能采用保守治疗的策略。体外扩增HSC技术可以解决细胞数量不足的难题，在临床上具有广泛的应用价值。近些年，利用化学小分子体外扩增脐带血来源HSC的研究已取得重大进展。芳烃受体抑制剂StemRegenin 1(SR1)、嘌呤类衍生物UM171两项研究均证明小分子化合物能够扩增HSC，并在临床研究中取得突破。但是由于SR1对HSC扩增效率较低，UM171存在抑制HSC红系分化的隐患，导致临床仍旧缺乏高效且作用机制明确的HSC扩增方案。因此，深入探究小分子化合物在增强HSC移植功能中的新应用具有重要意义。

发明内容

鉴于现有技术的不足，本发明提供一种增强造血干细胞移植能力的方法。

本发明方案包括以下方面：

一方面，基于研究结果，本发明提出一种通过JNK抑制剂上调造血干细胞CCN3基因的表达，从而增强造血干细胞移植能力的方法。

本发明还提供一种通过采用JNK抑制剂上调造血干细胞CCN3基因表达的方法。

本发明所述JNK抑制剂选自现有已知产品，例如SP600125、JNK-IN-7、JNK-IN-8、JNK-IN-9、JNK-IN-12、AS601245、Falcarindiol、DB07268、IQ-1S、和CC-401Hydrochloride、AS602801、BI-78D3。

本发明所述造血干细胞为骨髓造血干细胞、外周造血干细胞和/或脐带血造血干细胞。优选为CD34⁺细胞。

本发明所述的增强造血干细胞移植能力的方法，具体实施方式是：用含有SCF、Flt-3L、TPO、LDL的StemSpan培养基悬浮培养造血干细胞，细胞悬浮液中添加JNK抑制剂。

本发明所述的上调CCN3基因表达的方法，具体实施方式是：用含SCF、Flt-3L、TPO、LDL的StemSpan培养基悬浮培养造血干细胞，细胞悬浮液中添加JNK抑制剂。

优选的，细胞悬浮液中JNK抑制剂的添加量为8～20μM，细胞密度不高于1×10⁶颗/ml。StemSpan培养基中含有50～200ng/ml SCF、50～200ng/ml Flt-3L、10～100ng/ml TPO、1～100μg/ml LDL。

本发明另一个方案中，提供一种由本发明方法获得的造血干细胞。

另一方面，本课题的前期测序数据表明，在经过JNK抑制剂处理的造血干细胞的染色质中，FOXO1基因所在的区域处于开放状态，证明JNK抑制剂可能通过调控FOXO1的表达，参与调控维持造血干细胞的功能。基于本课题研究成果，本研究提出JNK-FOXO1-CCN3是JNK抑制剂调控HSC扩增的关键信号通路。本研究提供了作用机制明确的HSC扩增方案。

本发明所取得的有益效果：

本发明明确了JNK抑制剂调控HSC扩增的关键信号通路，提出了通过JNK抑制剂上调CCN3表达，进而增强造血干细胞移植能力的方法。