[发明专利]延胡索酸还原酶

权利要求书

1.具有延胡索酸还原酶活性的变体多肽，其与具有延胡索酸还原酶活性的参照多肽相比具有经改变的NADP(H)依赖性活性。

2.根据权利要求1所述的变体多肽，其与所述参照多肽相比具有增加的NADP(H)依赖性活性。

3.根据权利要求1或2所述的变体多肽，其与所述参照多肽相比具有降低的NAD(H)依赖性活性。

4.具有延胡索酸还原酶活性的变体多肽，任选地根据权利要求1所述的变体多肽，其与具有延胡索酸还原酶活性的参照多肽相比具有经改变的NAD(H)依赖性活性。

5.根据权利要求4所述的具有延胡索酸还原酶活性的变体多肽，其与所述参照多肽相比具有降低的NAD(H)依赖性活性。

6.根据权利要求4或5所述的变体多肽，其与所述具有延胡索酸还原酶活性的参照多肽相比具有增加的NADP(H)依赖性活性。

7.根据前述权利要求中任一所述的变体多肽，其中所述变体多肽包含氨基酸序列，所述氨基酸序列在与包含SEQ ID NO:33所示序列的延胡索酸还原酶比对时，包含对应于以下任意氨基酸位置的氨基酸残基的至少一个替换

1042、1071、1072、1082或1083

所述位置参照SEQ ID NO:33定义。

8.具有延胡索酸还原酶活性的变体多肽，所述变体多肽具有氨基酸序列，所述氨基酸序列在与包含SEQ ID NO:33所示序列的延胡索酸还原酶比对时，包含对应于以下任意氨基酸位置的氨基酸残基的至少一个替换

1042、1071、1072、1082或1083

所述位置参照SEQ ID NO:33定义，并且其中所述变体与具有延胡索酸还原酶活性的参照多肽相比具有一个或多个经改变的特性。

9.根据权利要求8所述的变体多肽，其中所述经改变的特性是经改变的NADP(H)依赖性活性例如增加的NADP(H)依赖性活性，和/或经改变的NAD(H)依赖性活性例如增加的NAD(H)依赖性活性。

10.根据前述权利要求中任一所述的变体多肽，其中所述参照多肽包含SEQ ID NO:33的延胡索酸还原酶。

11.根据前述权利要求中任一所述的变体多肽，其中所述变体多肽是非天然存在的多肽。

12.根据前述权利要求中任一所述的变体多肽，其包含除权利要求7或8所定义的那些之外的额外的替换。

13.根据前述权利要求中任一所述的变体多肽，其如表1所定义。

14.根据前述权利要求中任一所述的变体多肽，其与SEQ ID NO:33具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少97％、至少98％或至少99％的序列同一性。

15.核酸，其包含根据前述权利要求中任一所述的变体多肽的编码序列。

16.核酸构建体，其包含权利要求15所述的核酸序列，所述核酸序列可操作地连接到能够引导延胡索酸还原酶在合适表达宿主中表达的一种或多种控制序列。

17.表达载体，其包含根据权利要求15所述的核酸或根据权利要求16所述的核酸构建体。

18.宿主细胞，其包含根据权利要求15所述的核酸，根据权利要求16所述的核酸构建体或根据权利要求17所述的表达载体。