[发明专利]一种卡贝缩宫素的合成方法

权利要求书

1.一种卡贝缩宫素的合成方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）以Rink Amide-MBHA Resin为载体，溶胀处理后，依次将保护的Gly、保护的Leu、保护的Pro、保护的Cys、保护的Asn、保护的Gln、保护的Ile和保护的Tyr缩合反应偶联至溶胀Rink Amide-MBHA Resin，干燥得肽树脂1；

（2）肽树脂1与乙烯基乙酸反应，得肽树脂2，其结构如下：

CH₂=CH-CH₂-CO-Tyr（me）-Ile-Gln（Trt）-Asn（Trt）-Cys（Trt）-Pro-Leu-Gly-RinkAmide-MBHA Resin；

（3）肽树脂2裂解得卡贝缩宫素中间体I，其结构如下：

CH₂=CH-CH₂-CO-Tyr（me）-Ile-Gln（Trt）-Asn（Trt）-Cys（Trt）-Pro-Leu-Gly-NH₂；

（4）卡贝缩宫素中间体I环化反应后获得卡贝缩宫素；

所述步骤（2）的方法包括以下步骤：依次加入乙烯基乙酸、催化剂、缩合剂与肽树脂1反应，肽树脂1、乙烯基乙酸、催化剂、缩合剂的质量比为1:（2.5-3.5）:（5.5-6.5）:（2.5-3.5），得肽树脂2；

所述缩合剂选自以下一种或多种：EDC、DIC、DCC、HATU、HBTU、HCTU、PyBop、PyAop；

所述催化剂选自以下一种或多种：HOBt、NMM；

加入缩合剂后反应50-80min。

2.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于，所述步骤（1）的方法包括以下步骤：

将Rink Amide-MBHA Resin溶胀，脱保护，洗涤后；以其作为固相载体，加入保护的Gly、缩合剂和催化剂，保护的Gly进行缩合反应偶联到溶胀Rink Amide-MBHA Resin，脱保护，洗涤后；继续通过固相合成法依次将保护的Leu、保护的Pro、保护的Cys、保护的Asn、保护的Gln、保护的Ile和保护的Tyr缩合反应偶联至树脂，干燥得肽树脂1；

所述缩合剂选自以下一种或多种：EDC、DIC、DCC、HATU、HBTU、HCTU、PyBop、PyAop；

所述催化剂选自以下一种或多种：HOBt、NMM。

3.根据权利要求1或2所述的合成方法，其特征在于，所述Rink Amide-MBHA Resin载体的替代度为0.5-1.0 mmol/g。

4.根据权利要求1或2所述的合成方法，其特征在于，所述保护的Gly、保护的Leu、保护的Pro、保护的Cys、保护的Asn、保护的Gln、保护的Ile和保护的Tyr如下：

Fmoc-Gly-OH或Boc-Gly-OH、Fmoc-Leu-OH或Boc-Leu-OH、Fmoc-Pro-OH或Boc-Pro-OH、Fmoc-Cys（Trt）-OH、Fmoc-Asn（Trt）-OH、Fmoc-Gln（Trt）-OH、Fmoc-Ile-OH和Fmoc-Tyr（Me）-OH。

5.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于，步骤（3）的裂解反应包括以下步骤：

肽树脂2加入裂解液于20-40℃反应2-5小时，过滤，滤液滴加到沉淀液中，滴加完毕后静置1-3小时，过滤，滤饼洗涤、干燥得卡贝缩宫素中间体I。

6.根据权利要求5所述的合成方法，其特征在于，所述裂解液为三异丙基硅烷和三氟乙酸分别以体积百分比2-5%和95-98%形成的混合液，所述沉淀液为乙醚、石油醚、乙酸乙酯、甲基叔丁基醚中的一种或多种。

7.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于，所述步骤（4）的环化反应包括以下步骤：

卡贝缩宫素中间体I加入40-60%（v/v）乙腈水溶液中溶解，依次加入二硫苏糖醇或β-巯基乙醇、偶氮二异丁腈，然后调节溶液pH为8.5-9.5，在20-40℃下反应1-2小时，最后调节pH为6.8-7.2以终止反应，过滤得卡贝缩宫素。

8.根据权利要求7所述的合成方法，其特征在于，所述卡贝缩宫素中间体I、二硫苏糖醇或β-巯基乙醇、偶氮二异丁腈的摩尔比为1:（0.8-1.2）:（0.4-0.6）。