[发明专利]猫泛白细胞减少症病毒抗体、含有猫泛白细胞减少症病毒抗体的试剂盒及应用

说明书

本发明提供了抗体，其Ig单体的基本单位构成，该Ig单体的重链可变区如SEQ ID NO.1所示，轻链可变区如SEQ ID NO.2所示；或该Ig单体的重链可变区如SEQ ID NO.3所示，轻链可变区如SEQ ID NO.4所示。上述两种抗体组成的猫泛白细胞减少症病毒胶体金检测试纸条能对猫泛白细胞减少症病毒抗原进行检测，敏感性高、特异性好。上述抗体的重链可变区和轻链可变区还可用于制备单链抗体，该单链抗体可用于猫泛白细胞减少症病毒的反应性评价。

技术领域

本发明涉及猫泛白细胞减少症病毒抗体，以及含抗体制备的试剂盒和应用，属于免疫测定法领域。

背景技术

猫泛白细胞减少症病毒(又称猫细小病毒或猫瘟病毒，Feline panleukopeniavirus，FPV)，属于细小病毒属，是三种极为相似的自主复制型病毒(参见于明科等.水貂肠炎病毒、猫泛白细胞减少症病毒以及犬细小病毒2型间的关系比较.中国兽医杂志,1992(6):45-47)，属于致病性最强、感染范围最宽的一种；四季均可引发感染，能引起犬、猫、水貂的高度接触性、急性传染病，引发的临床症状为高热、呕吐、严重脱水、白细胞减少，体温升高，食欲废绝，精神沉郁，感染率、死亡率均较高，特别地幼龄动物死亡率高达90％，带来巨大损失(参见饶家辉等.猫细小病毒、犬细小病毒、貂细小病毒的特征比较.中国畜牧兽医,2009,36(7):166-168)。

在世界范围内，猫作为实验动物在医学、生物学等实验和动物疾病模型研究中的应用越来越广泛，在某些试验中，如药理学、血压相关试验、疾病诊断、营养学相关研究、肿瘤学、解剖学等研究中功不可没。猫作为实验动物，虽然应用越来越广泛，但由于检测试剂缺乏，用作试验的猫多数为未经严格检测的宠物猫、捕获的野猫或中华田园猫，国内目前尚未见有开展实验用猫的检测报告，安全隐患突显。

目前，检测猫泛白细胞减少症病毒的方法包括PCR、血凝试验等方法，但这些方法各有缺点，以PCR(参见刘维全等.肉食兽细小病毒通用PCR诊断技术的建立.中国兽医学报.2001,21(3):249-251)为主的分子生物学方法对技术和设备要求均较高、操作繁琐、耗时较长；血凝试验不仅需要红细胞且要求红细胞必须现配现用，操作时间较长，临床实际检测时发现还易受分泌物或排泄物中的杂质干扰。上述这些检测方法均难以在兽医临床现场应用。此外，目前商品化的试纸条产品检测的靶标仅为粪便、肛拭子，当用于检测其他类型的样本时，准确度不能保证。

因此，为了保证试验时实验猫的质量水平、提高实验的准确度，为了保障养猫人的人身健康和安全，急需研制一种快速简便、准确地检测猫泛白细胞减少症病毒的产品以用于临床诊断。

发明内容

为解决现有技术的不足，本发明提供了一对猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体，以及含单克隆抗体的试剂盒及其应用。

本发明涉及一种抗体，其由Ig单体的基本单位构成，所述Ig单体分子含有四条异源性多肽链，其中，分子量较大的两条链为重链，分子量较小的两条链为轻链，同一所述Ig分子中的所述两条重链之间的氨基酸组成完全相同，同一所述Ig分子中的所述两条轻链之间的氨基酸组成完全相同，其中，每一条所述重链的N端上具有重链可变区，所述重链可变区如SEQ ID NO.1所示，每一条所述轻链的N端上具有轻链可变区，所述轻链可变区如SEQID NO.2所示。

本发明抗体的重链可变区SEQ ID NO.1、轻链可变区SEQ ID NO.2能与猫泛白细胞减少症病毒具有良好的结合能力，HI效价为1∶5120、IFA效价为1∶6400。

作为本发明的一种实施方式，所述抗体为IgA、IgD、IgE、IgG或IgM。

本发明还涉及一种特异性结合猫泛白细胞减少症病毒的抗体或其片段，其中，所述抗体或其片段的重链可变区如SEQ ID No.1所示或其经过一个或多个氨基酸添加、删除、替换或修饰保守性突变获得的保守性变异体，以及所述抗体或其片段轻链可变区如SEQ IDNo.2所示或其经过一个或多个氨基酸添加、删除、替换或修饰保守性突变获得的保守性变异体。