[发明专利]一种用于生产β-榄香烯或吉马烯A的重组菌株

权利要求书

1.一种重组菌，所述重组菌的出发菌株为酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae），所述重组菌中表达有吉马烯A合酶（GAS），所述GAS来源于多变鱼腥藻（Anabaena variabilis）ATCC 29413，所述GAS的氨基酸序列如SEQ ID No.1或SEQ ID No.9所示。

2.根据权利要求1所述的重组菌，其特征在于，所述重组菌还表达有如下任一或任意几种目的基因：3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A（HMGR1），法尼基焦磷酸合酶（ERG20）；所述HMGR1的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，所述ERG20的氨基酸序列如SEQ ID No.3所示。

3.根据权利要求1-2任一所述的重组菌，其特征在于，所述重组菌中还具有如下任一或任意几种操作：

（1）下调鲨烯合酶（erg9）的表达；（2）失活或抑制二酰甘油焦磷酸磷酸酶1（dpp1）的表达；（3）失活或抑制脂质磷酸酶1（lpp1）的表达；（4）表达有外排通道蛋白pdr5和/或外排通道蛋白SNQ2；

所述erg9的氨基酸序列如SEQ ID No.4所示，所述dpp1的氨基酸序列如SEQ ID No.5所示，所述lpp1的氨基酸序列如SEQ ID No.6所示，所述pdr5的氨基酸序列如SEQ ID No.8所示，所述SNQ2的氨基酸序列如SEQ ID No.10所示。

4.一种制备重组菌的方法，所述方法包括在酿酒酵母中表达吉马烯A合酶（GAS）的步骤，所述GAS来源于多变鱼腥藻（Anabaena variabilis）ATCC 29413，所述GAS的氨基酸序列如SEQ ID No.1或SEQ ID No.9所示。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述方法还包括在酿酒酵母中进行如下任一或任意几种操作：

（1）表达3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A（HMGR1）；

（2）表达法尼基焦磷酸合酶（ERG20）；

（3）下调鲨烯合酶（erg9）的表达；

（4）失活或抑制二酰甘油焦磷酸磷酸酶1（dpp1）；

（5）失活或抑制脂质磷酸酶1（lpp1）；

（6）表达外排通道蛋白pdr5和/或外排通道蛋白SNQ2；

所述HMGR1的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，所述ERG20的氨基酸序列如SEQ ID No.3所示，所述erg9的氨基酸序列如SEQ ID No.4所示，所述dpp1的氨基酸序列如SEQ ID No.5所示，所述lpp1的氨基酸序列如SEQ ID No.6所示，所述pdr5的氨基酸序列如SEQ ID No.8所示，所述SNQ2的氨基酸序列如SEQ ID No.10所示。

6.权利要求1-3任一所述的重组菌或权利要求4-5任一方法制备得到的重组菌在生产β-榄香烯和/或吉马烯A中的应用。

7.一种生产β-榄香烯和/或吉马烯A的方法，所述方法包括对权利要求1-3任一所述的重组菌或权利要求4-5任一方法制备得到的重组菌进行发酵的步骤。

8.一种吉马烯A合酶（GAS）的突变体，所述突变体的氨基酸序列如SEQ ID No.9所示。

9.包含权利要求8所述的突变体的载体或宿主细胞。

10.权利要求8所述的突变体，或者权利要求9所述的载体或宿主细胞在生产β-榄香烯和/或吉马烯A中的应用。