[发明专利]猪BMP7基因3`-UTR全序列、与繁殖性状关联的突变位点及其应用在审

专利信息
申请号: 202010997191.9 申请日: 2020-09-21
公开(公告)号: CN112301135A 公开(公告)日: 2021-02-02
发明(设计)人: 李齐发;尹杭;杜星;潘增祥 申请(专利权)人: 南京农业大学
主分类号: C12Q1/6888 分类号: C12Q1/6888;C12N15/11
代理公司: 南京天华专利代理有限责任公司 32218 代理人: 徐冬涛;李晓峰
地址: 211225 江苏省南京市溧*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: bmp7 基因 utr 序列 繁殖 性状 关联 突变 及其 应用
【说明书】:

发明公开了猪BMP7基因3'‑UTR全序列、与繁殖性状关联的突变位点及其应用,两个与猪繁殖性状显著关联的突变位点,分别位于猪BMP7基因3'‑UTR的第273位和955位,其中第一个位点为AG突变,命名为c.1569AG,第二个突变为插入/缺失突变,命名为c.2251indelCTGGGGT。母猪繁殖性状是一个低遗传力性状,采用常规育种技术遗传进展较慢,由于所述突变位点的合并基因型与母猪总产仔数显著关联,而与产活仔数的关联性接近显著,采用简便的基因分型技术检测这2个位点,便可选留高产基因型个体,淘汰低产基因型个体,这对选留高产个体、提高母猪群体的繁殖性能具有重要的经济价值。

技术领域

本发明属于分子生物学领域,涉及猪BMP7基因3′-UTR全序列、与繁殖性状关联的突变位点及其应用。

背景技术

骨形态发生蛋白7(Bone morphogenetic protein 7,BMP7)是TGF-β超家族BMP亚家族的重要成员,在哺乳动物各种组织和器官中广泛表达,并参与各种重要生理和病理过程中的调控。在雌性哺乳动物中,BMP7是维持生殖相关组织和器官如下丘脑-垂体系统、卵巢、输卵管和子宫等的正常功能必需的。在卵巢组织中,BMP7主要由卵泡膜细胞分泌,可调控各种卵巢功能。在体外培养的卵泡细胞中,抑制BMP7可以诱导牛卵泡膜细胞抑制雄激素分泌,而添加BMP7融合蛋白则可以刺激水牛卵巢颗粒细胞释放雌激素,使人卵巢颗粒-黄体细胞和水牛卵巢黄体细胞产生黄体酮。BMP7还可促进水牛卵巢中颗粒细胞的存活和大鼠卵巢中颗粒细胞的增殖。在大鼠卵巢中注射BMP7会增加原始卵泡、初级卵泡、窦前卵泡和窦卵泡的数量,并降低排卵率和血清中的孕酮水平。在卵巢颗粒细胞中,BMP7可通过PCNA基因调控细胞增殖,通过PI3K/PDK-1/PKC通路调控细胞凋亡,通过类固醇激素合成通路关键基因如FSHR、CYP19A1和StAR等调控雌激素和孕酮生成,还可通路HA合成通路限速酶HAS2基因调控细胞外基质成分的合成。总之,BMP7是雌性生殖、卵泡发育和颗粒细胞功能的关键调节因子。

BMP7与家畜繁殖性能关系密切。在绵羊中,高繁殖力个体或品种卵巢组织中BMP7基因表达水平显著高于低繁殖力个体或品种;启动子区g.58171886突变与小尾寒羊产羔数性状显著关联。在猪中,BMP7基因第3内含子g.35161TC位点多态性与产活仔数(NBA)和出生窝重(LW)显著关联,与21天窝重(LW21)极显著关联。目前猪BMP7基因5′-UTR和编码区序列已被克隆和鉴定,但3′-UTR尚未被鉴定。

发明内容

本发明目的在于提供猪BMP7基因3′-UTR全序列。

本发明的另一目的在于提供一组与猪繁殖性状显著关联的突变位点及其在选留高产个体、辅助选育高产母猪群体中的应用。

本发明的又一目的在于提供一种选育高产母猪的方法,该方法利用突变位点检测技术进行高产个体的选留、高产母猪群体的辅助选育。

本发明的目的可以通过以下技术方案实现:

如SEQ ID NO.1所示的猪BMP7基因3′-UTR全序列,序列长度为1538bp。

一组与猪繁殖性状显著关联的突变位点,该组突变位点包括两个分别位于如SEQID NO.1所示的猪BMP7基因3′-UTR的第273位和第955位的突变位点,其中第一个位点为AG突变,命名为c.1569AG,第二个位点为插入/缺失突变,命名为c.2251indelCTGGGGT;两个突变位点共形成6种基因型,AG/ID型母猪的总产仔数和产活仔数高于GG/ID型母猪,其中AG/ID型母猪总产仔数(TNB)比GG/ID型母猪高0.67头/胎(差异显著),而产活仔数(NBA)比GG/ID型母猪高0.55头/胎。

一种用于检测上述突变位点的特异性引物组,该特异性引物组包括引物对1和引物对2,所述引物对1的正反向引物如SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示,所述引物对2的正反向引物如SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.5所示。

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