[发明专利]一种贝莱斯芽孢杆菌及发酵方法与应用

说明书

本发明公开了一种贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis XW0513 CGMCC No.20474，其具有抗真菌的能力。本发明的一种贝莱斯芽孢杆菌对病原菌灰霉菌，根腐菌，尖镰孢菌黄瓜专化型，串珠镰孢菌，稻瘟菌，稻巨座壳和黄曲霉都有明显的抑制效果，抗真菌谱广。而对病原细菌则无抑菌作用。说明菌株XW0513对多种病原真菌具有较好的抑制效果。

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种贝莱斯芽孢杆菌及发酵方法与应用。

背景技术

在农作物病害日趋严重的今天，为保证农作物正常生长，提高产量，农药已成农业发展所需。因化学类农药价格低廉，种类多且见效快，所以，绝大多数地区仍以化学类农药为主。但是长期化学类农药的滥用已经造成了大范围的环境污染，危及了许多田间有益生物，同时也已严重威胁到人类的健康。所幸这种现象已经引起了全世界的广泛关注，随着人们的健康意识及环保意识日益增强，化学类农药在全球范围内正普遍被限制使用甚至被淘汰，而使用生物农药，其具有许多优点，诸如：(1)对人、畜及生态环境几乎没有影响；(2)对农产品无污染；(3)对靶标菌与害虫针对性极强；(4)可保护害虫天敌；(5)害虫及病原菌不易产生抗性。生物农药是防治植物病害最有效的途径之一，也是绿色农业最为理想的选择。因此，研究开发低毒、环境友好的绿色生物农药已经成为农药学领域必然的发展趋势。

芽孢杆菌(Bacillus)是一类产芽孢的革兰氏阳性菌，因芽孢杆菌具有抗逆性强、抗菌谱广及生长代谢速度快等优点，被广泛应用于植物病害的防治研究中。芽孢杆菌可以产生多种抑菌物质，与传统的抗生素不同，其主要是通过与微生物细胞膜发生作用，会导致膜内物质泄露，甚至会使细胞溶解直接致使细胞死亡。目前，许多研究都表明大部分贝莱斯芽孢杆菌的次级代谢产物具有广谱的抑病原菌活性，被用来增加农作物产量，保护生态环境及平衡农业生态系统。

现有文献报道中，如李姝江等从贝莱斯芽孢杆菌发酵液中纯化出了一种分子质量约为31.0ku的可以抑制暗孢节菱孢菌的抗菌蛋白，此蛋白耐高温，不耐酸碱，对紫外线及部分有机试剂敏感，Chen等研究了花生内生细菌贝莱斯芽孢杆菌LDO2，发现该菌株LDO2显著抑制花生病原菌的生长，对黄曲霉也抑制作用，导致其菌丝畸形。金疏桐等筛选出一株对金黄色葡萄球菌、伤寒沙门菌以及痢疾志贺菌都有拮抗作用的B.velezensis HBB5。但文献报道的贝莱斯芽孢杆菌的抑菌效果为仅可抑制某种特定菌种或可抑制1-2种农业致病菌，抗菌谱窄。

因此，亟需筛选出抑菌谱广、抑菌效果显著又稳定的芽孢杆菌在生物防治方面具有重要意义和广阔前景。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种贝莱斯芽孢杆菌。

本发明的第二个目的是提供一种贝莱斯芽孢杆菌的发酵方法。

本发明的第三个目的是提供一种贝莱斯芽孢杆菌在制备抗农作物真菌病药物的应用。

本发明的技术方案概述如下：

一种贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis XW0513 CGMCC No.20474，其具有抗真菌的能力。

所述真菌为灰霉菌，根腐菌，尖镰孢菌黄瓜专化型，串珠镰孢菌，稻瘟菌，稻巨座壳或黄曲霉。

上述贝莱斯芽孢杆菌的发酵方法，包括如下步骤：将landy液体培养基按比例为60-100ml/250ml的装液量加入培养容器中，按接种体积比为4-8％的比例将所述贝莱斯芽孢杆菌挑至landy液体培养基中，在28-32℃、180-220rpm，恒温摇床振荡培养46-50h，降温至4℃，离心，弃沉淀，上清液经0.45μm滤膜去除菌体，4℃保藏备用。