[发明专利]多硫代二酮哌嗪合成相关蛋白质及其相关生物材料与应用

说明书

本发明公开了多硫代二酮哌嗪合成相关蛋白质及其相关生物材料与应用。该多硫代二酮哌嗪合成相关的蛋白质，名称为TdaG，来源于炭团木霉(Trichoderma hypoxylon)，其氨基酸序列是序列表中序列2的蛋白质。调控TdaG及其编码基因表达的物质可用于调控炭团木霉合成多硫代二酮哌嗪，如提高炭团木霉合成所述多硫代二酮哌嗪的能力或赋予炭团木霉合成所述多硫代二酮哌嗪的能力。将炭团木霉的TdaG基因敲除得到的炭团木霉TdaG基因敲除突变株能产生具有抗结肠癌和肝癌活性的多硫代二酮哌嗪(结构式为式1的化合物)。结构式为式1的化合物可用于治疗抗结肠癌和抗肝癌疾病的药物开发。

技术领域

本发明涉及多硫代二酮哌嗪合成相关蛋白质及其相关生物材料与应用。

背景技术

木霉具有产生结构丰富、活性多样的次级代谢产物的能力，是药物发现的重要来源。多硫代二酮哌嗪类化合物的结构特征为含有硫桥的二酮哌嗪母核，具有丰富多样的生物活性，如抗肿瘤、抗菌、抗阿尔茨海默症等生物活性。前期研究表明，炭团木霉可以产生结构丰富的次级代谢产物，目前已经分离得到的多硫代二酮哌嗪类化合物衍生物trichodermamide A、aspergillazine A、aspergillazine C以及单端孢霉烯类毒素(harzianum B)的结构式如下所示：

发明内容

本发明所要解决的技术问题是如何制备具有抗肿瘤活性的多硫代二酮哌嗪。

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种多硫代二酮哌嗪合成相关的蛋白质，名称为TdaG，来源于炭团木霉(Trichoderma hypoxylon)，是如下A1)、A2)或A3)的蛋白质：

A1)氨基酸序列是序列表中序列2的蛋白质；

A2)将序列表中序列2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与A1)所示的蛋白质具有90％以上的同一性且与多硫代二酮哌嗪合成相关的蛋白质；

A3)在A1)或A2)的N末端或/和C末端连接蛋白标签得到的融合蛋白质。

上述蛋白质中，序列表中的序列2由497个氨基酸残基组成。

上述蛋白质可人工合成，也可先合成其编码基因，再进行生物表达得到。

上述蛋白质中，所述蛋白标签(protein-tag)是指利用DNA体外重组技术，与目的蛋白一起融合表达的一种多肽或者蛋白，以便于目的蛋白的表达、检测、示踪和/或纯化。所述蛋白标签可为Flag标签、His标签、MBP标签、HA标签、myc标签、GST标签和/或SUMO标签等。

上述蛋白质中，同一性是指氨基酸序列的同一性。可使用国际互联网上的同源性检索站点测定氨基酸序列的同一性，如NCBI主页网站的BLAST网页。例如，可在高级BLAST2.1中，通过使用blastp作为程序，将Expect值设置为10，将所有Filter设置为OFF，使用BLOSUM62作为Matrix，将Gap existence cost，Per residue gap cost和Lambda ratio分别设置为11，1和0.85(缺省值)并进行检索一对氨基酸序列的同一性进行计算，然后即可获得同一性的值(％)。

上述蛋白质中，所述90％以上的同一性可为至少91％、92％、95％、96％、98％、99％或100％的同一性。

上述蛋白质中，所述TdaG可来源于炭团木霉(Trichoderma hypoxylon)。

与TdaG相关的生物材料也属于本发明的保护范围。

本发明所提供的与TdaG相关的生物材料，为下述B1)-B9)中的任一种：

B1)编码TdaG的核酸分子；