[发明专利]一株贝莱斯芽孢杆菌及其筛分培养方法和应用

说明书

本发明提供了一株贝莱斯芽孢杆菌及其筛分培养方法和应用。所述贝莱斯芽孢杆菌的分类命名为Bacillus velezensis B3‑4，该菌株已于2020年5月29日保藏于中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为CCTCC NO：M 2020160。所述筛分培养方法包括以下步骤：采集样品并低温保存；采用梯度稀释法将样品的稀释液涂布在牛肉膏蛋白胨培养基上，15～50℃恒温培养；待培养基长出菌落后，挑选形态不同的菌落进行划线培养；随后，挑取一环菌落进行重复划线培养，并结合显微观察，直至获得纯化后的菌株。所述贝莱斯芽孢杆菌能够有效降解去除人粪便和生活污水中的有机质和COD。

技术领域

本发明涉及环境微生物技术领域，具体来讲，涉及一株贝莱斯芽孢杆菌及其筛分培养方法和应用。

背景技术

早在2000年初期，国家就提出了改造厕所的战略目标，将厕所改造作为改造环境、打造健康人居的重要项目。

环保厕所作为“厕所革命”的产物，经过不断的发展，目前应用较多的环保厕所类型有水冲和免水冲两种，由于中国大部分地区资源较缺乏，因此近几年，可实现免冲洗和粪便资源化等功能的免水冲生物降解型免冲厕所得到了大量关注。但在技术上重点体现在设备结构设计上，而对于生物处理中微生物菌种资源方面，涉及较少。例如，于2010年03月03日公开的名称为箱体式生态厕所、公开号为CN101658398A的专利申请文献记载了粪肠球菌、木糖葡萄球菌、蜡状芽孢杆菌、产氨棒杆菌、地衣芽孢杆菌和活动肉杆菌为降解菌。于2014年04月23日公开的名称为一种免水生态厕所、公开号为CN103735211A的专利申请文献中记载了粪肠球菌、木糖葡萄球菌、生孢食纤维菌、镰刀霉菌、地衣芽孢杆菌、活动肉杆菌为降解菌。于2019年06月21日公开的名称为一种处理人体粪便的微生物处理菌剂及其制备方法和应用、公开号为CN109913389A的专利申请文献记载了地衣芽孢杆菌、毕赤酵母、干酪乳杆菌为降解菌。这些专利提供的降解菌均为复合菌种，且涉及的降解菌种类较为单一固定。

因此，为进一步丰富用免水冲生物降解型生态厕所粪便处理的菌种资源，开展人粪便和生活废水的有机质及COD高效降解菌株驯化筛选十分必要。

发明内容

本发明的目的在于解决现有技术存在的上述不足中的至少一项。例如，本发明的目的之一在于提供一种高效降解去除人粪便和生活污水中的有机质和COD的贝莱斯芽孢杆菌及其筛分培养方法和应用。

为了实现上述目的，本发明的一方面提供了一株贝莱斯芽孢杆菌，所述贝莱斯芽孢杆菌的分类命名为贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis B3-4，已于2020年5月29日保藏于中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为CCTCC NO：M2020160。

在本发明一株贝莱斯芽孢杆菌的一个示例性实施例中，所述贝莱斯芽孢杆菌为革兰氏阳性菌，有芽孢，菌体为杆状，有运动性，专性需氧。

在本发明一株贝莱斯芽孢杆菌的一个示例性实施例中，所述贝莱斯芽孢杆菌的16S rDNA序列如SEQ ID NO.1所示。

在本发明一株贝莱斯芽孢杆菌的一个示例性实施例中，所述贝莱斯芽孢杆菌在牛肉膏蛋白胨培养基上培养24h后形成的菌落为圆形或不规则形状，48h后菌落为圆形，白色，直径为0.5～1mm，边缘不整齐，扁平湿润。

在本发明一株贝莱斯芽孢杆菌的一个示例性实施例中，所述贝莱斯芽孢杆菌具有抗逆特性，能够在盐浓度为0.5～4％的培养基中生长。

本发明的另一方面提供了一种贝莱斯芽孢杆菌的筛分培养方法，所述筛分培养方法包括以下步骤：采集样品并低温保存，所述样品包括人粪便、畜禽粪便、土壤、水、淤泥以及有机肥；采用梯度稀释法将所述样品的稀释液涂布在牛肉膏蛋白胨培养基上，15～50℃恒温培养；待所述培养基长出菌落后，从牛肉膏蛋白胨平板上挑选形态不同的菌落进行划线培养；随后，挑取一环菌落进行重复划线培养，并结合显微观察，直至获得纯化的菌株。