[发明专利]一种利用白榆组织制备植物杂交育种粘合剂的方法及应用有效
| 申请号： | 202011002488.3 | 申请日： | 2020-09-22 |
| 公开（公告）号： | CN112106650B | 公开（公告）日： | 2021-11-16 |
| 发明（设计）人： | 黄印冉;刘易超;冯树香;闫淑芳;董谦;李雪塞;邢智远;于殿成 | 申请（专利权）人： | 河北省林业和草原科学研究院 |
| 主分类号： | A01H1/02 | 分类号： | A01H1/02 |
| 代理公司： | 北京睿智保诚专利代理事务所(普通合伙) 11732 | 代理人： | 王灿 |
| 地址： | 050000 河*** | 国省代码： | 河北;13 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 利用 组织 制备 植物 杂交育种 粘合剂 方法 应用 | ||
1.一种利用白榆组织制备植物杂交育种粘合剂的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)将白榆树组织，加入磷酸盐缓冲液，研磨至浆状，得到含有植物杂交育种粘合剂的浆液；
(2)将含有植物杂交育种粘合剂的浆液离心，取中层粘稠状物质，得到植物杂交育种粘合剂；
所述白榆树组织与磷酸盐缓冲液的用量比为1g：8～12mL；
所述磷酸盐缓冲液的pH为7.0～7.4；
所述白榆树组织为幼茎段组织；
所述研磨的条件为冰浴研磨；
所述的含有植物杂交育种粘合剂的浆液离心的条件为：离心转速为10000～12000r/min，离心温度为2～6℃，离心时间为4～10min；
验证所述粘合剂的方法为：采用内参引物进行PCR扩增后得到的扩增产物，经过2％的琼脂糖凝胶电泳进行验证，在126bp处无条带，即为不含遗传物质的粘合剂，可以使用，在126bp有条带则粘合剂含有遗传物质，不能使用；
所述内参引物的正向引物为TATAATGAATTGCGTGTAGCCC，反向引物为CATAGCAGGAGTGTTGAAGGTC；
PCR扩增的反应程序为：预变性95℃10min；变性95℃50s、退火55℃50s、延伸72℃60s，循环35次；总延伸72℃10min；
PCR扩增的反应体系为：10×Buffer 10μL；dNTP 2μL；粘合剂2μL；正向引物2μL；反向引物2μL；rTaq 1μL；ddH2O 81μL；总体系为100μL。
2.权利要求1所述的方法制备得到的植物杂交育种粘合剂在榔榆与榉树，青檀与中华金叶榆杂交中的应用。
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