[发明专利]一种卵黄高磷蛋白磷酸肽和卵黄多肽的工业化制备方法

说明书

本发明公开了一种卵黄高磷蛋白磷酸肽和卵黄多肽的工业化制备方法，属于生物技术领域。本发明以脱脂蛋黄粉，尤其是经工业化提取卵磷脂后变性严重、功能性丧失、价值严重降低的脱脂蛋黄粉为原料，通过两次酶解，第一次酶解后用陶瓷膜分离卵黄多肽和卵黄高磷蛋白，对卵黄高磷蛋白碱处理后进行第二次酶解，从而同时制备卵黄多肽和卵黄高磷蛋白磷酸肽。本发明的方法可以对脱脂蛋黄粉进行充分利用，尤其是能有效提高工业化提取卵磷脂后的低值脱脂蛋黄粉的价值，同步实现卵黄多肽和卵黄高磷蛋白磷酸肽的工业化生产。

技术领域

本发明涉及一种卵黄高磷蛋白磷酸肽和卵黄多肽的工业化制备方法，属于生物技术领域。

背景技术

蛋黄营养价值高，主要成分是蛋白质和脂类，其中，蛋黄卵磷脂是其中具有重要价值的功能成分。随着蛋品精深加工的开展，在提取蛋黄中优质卵磷脂的过程中会同时产生大量的脱脂蛋黄粉副产品，由于在提取过程使用了酒精等有机溶剂，脱脂蛋黄粉中的蛋白严重变性，基本丧失原有功能性，其价值降低，因而目前多用作动物饲料，造成蛋白资源的极大浪费。自20世纪以来，许多学者已从鸡蛋黄中分离得到了多种活性多肽，目前已发现卵黄蛋白活性肽具有抗氧化、降血压、促进矿物质元素吸收等多种生理功能，可广泛地应用于食品、保健品和药品等相关领域，极具开发前景。卵黄高磷蛋白磷酸肽是由卵黄高磷蛋白水解而成的活性肽，卵黄高磷蛋白是自然界中磷酸化程度最高的蛋白质，由216个氨基酸组成，其中有一半的氨基酸是丝氨酸，有100个左右的丝氨酸发生了磷酸化，卵黄高磷蛋白在被人体摄入后在大量磷酸基团的保护下，并不能经过水解而被人体利用。因此须在体外加工制备成卵黄高磷蛋白磷酸肽才能被人体吸收利用。卵黄高磷蛋白磷酸肽含有大量磷酸丝氨酸残基，可以与金属离子络合，具有较好的金属离子螯合能力，并且有多项研究表明，卵黄高磷蛋白磷酸肽的持钙能力要优于商业化的酪蛋白磷酸肽，可促进钙的吸收。另外，卵黄高磷蛋白磷酸肽还具有抗炎、提高免疫力等功能。

然而现有对于卵黄多肽的研究主要集中在其功能性方面，而对于卵黄多肽的制备工艺，研究主要集中在对其酶解工艺的优化方面，并且研究采用的原料多为经索氏提取法制备的脱脂蛋黄粉，这种蛋黄粉的变性程度相对较低，性质与工业化生产的脱脂蛋黄粉相差较大。前人制备卵黄高磷蛋白磷酸肽的工艺往往是从蛋黄中提取卵黄高磷蛋白，导致蛋黄不能综合利用，而且采用价格昂贵的分离纯化手段，不适合进行工业化大规模生产。

发明内容

为了解决上述至少一个问题，本发明以脱脂蛋黄粉，尤其是经工业化提取卵磷脂后变性严重、功能性丧失、价值严重降低的脱脂蛋黄粉为原料，通过两次酶解，第一次酶解后用陶瓷膜分离卵黄多肽和卵黄高磷蛋白，对卵黄高磷蛋白碱处理后进行第二次酶解，从而同时制备卵黄多肽和卵黄高磷蛋白磷酸肽。本发明的方法可以对脱脂蛋黄粉进行充分利用，尤其是能有效提高工业化提取卵磷脂后的低值脱脂蛋黄粉的价值，同步实现卵黄多肽和卵黄高磷蛋白磷酸肽的工业化生产。

本发明的第一个目的是提供一种工业化同时制备卵黄高磷蛋白磷酸肽和卵黄多肽的方法，包括如下步骤：

(1)预处理：将脱脂蛋黄粉溶解后进行匀浆处理，得到脱脂蛋黄粉匀浆；

(2)第一次酶解：将步骤(1)的脱脂蛋黄粉匀浆进行酶解，得到卵黄多肽酶解液；

(3)澄清分离：对步骤(2)得到的卵黄多肽酶解液进行pH调节，然后用陶瓷膜进行澄清分离，得到卵黄多肽澄清液和卵黄高磷蛋白沉淀物；

(4)对步骤(3)得到的卵黄多肽澄清液进行纳滤脱盐浓缩、精制、干燥得到卵黄多肽产品；

(5)对步骤(3)得到的卵黄高磷蛋白沉淀物进行碱处理脱磷、第二次酶解、澄清、脱盐浓缩、精制、干燥；得到卵黄高磷蛋白磷酸肽产品。

在本发明的一种实施方式中，所述的脱脂蛋黄粉可以是市售的脱脂蛋黄粉，也可以是工业化提取卵磷脂后的低值脱脂蛋黄粉，蛋白含量为60％-90％。

在本发明的一种实施方式中，步骤(1)所述匀浆处理是湿法粉碎或均质处理。