[发明专利]一种苯硼酸-壳聚糖修饰的整体柱及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种苯硼酸-壳聚糖修饰的整体柱的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)烷基化壳聚糖的制备：将壳聚糖溶于酸溶液中搅拌至明胶状，滴加入烯丙基三甲氧基硅烷醇溶液于加热条件下反应制得烷基化壳聚糖溶液；

(2)苯硼酸功能化壳聚糖的制备：在制得的所述烷基化壳聚糖溶液中滴加入碱溶液进行碱化沉淀反应，将得到的沉淀进行洗涤、烘干后得到改性壳聚糖；

将4-羧基苯硼酸溶于非质子溶剂中，加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺进行反应30min，然后加入所述改性壳聚糖，在低于40℃下搅拌反应24h制得苯硼酸功能化壳聚糖，水洗、烘干；

(3)苯硼酸-壳聚糖修饰的整体柱的制备：将所述苯硼酸功能化壳聚糖、甲基丙烯酸、乙二醇二甲基丙烯酸酯、醇、引发剂混合均匀后注入经活化的毛细管中，在低于80℃下进行反应12h以上，冲洗后得到苯硼酸-壳聚糖修饰的整体柱。

2.根据权利要求1所述的一种苯硼酸-壳聚糖修饰的整体柱的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述壳聚糖的脱乙酰度大于85％，所述酸溶液为体积浓度1％的醋酸溶液；所述烯丙基三甲氧基硅烷醇溶液中溶剂为无水乙醇、溶质为烯丙基三甲氧基硅烷，所述溶质在所述溶剂中的浓度为0.1mL/15mL。

3.根据权利要求1所述的一种苯硼酸-壳聚糖修饰的整体柱的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述壳聚糖在所述酸溶液中的用量为0.01g/mL；所述壳聚糖与所述烯丙基三甲氧基硅烷醇溶液中的烯丙基三甲氧基硅烷的用量比为1g/0.1mL。

4.根据权利要求1所述的一种苯硼酸-壳聚糖修饰的整体柱的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述加热条件下反应为在60℃的水浴条件下反应6h。

5.根据权利要求1所述的一种苯硼酸-壳聚糖修饰的整体柱的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述碱溶液为NaOH溶液，所述碱溶液中的NaOH与所述烷基化壳聚糖的质量比为(0.3-0.5):1。

6.根据权利要求1所述的一种苯硼酸-壳聚糖修饰的整体柱的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述非质子溶剂为二甲基亚砜；所述4-羧基苯硼酸在所述非质子溶剂中的用量为0.5～1.5mg/mL；所述4-羧基苯硼酸、所述1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、所述N-羟基琥珀酰亚胺的质量比为(10-12):(13-18):(8-10)。

7.根据权利要求1所述的一种苯硼酸-壳聚糖修饰的整体柱的制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述毛细管的活化过程为：依次用蒸馏水、NaOH溶液、蒸馏水、HCl溶液、蒸馏水、丙酮以0.1mL/min的流速通过毛细管柱30min、随后将3-(异丁烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷与丙酮的混合物注入毛细管柱中，硅胶塞密封，50℃反应12h，即完成活化。

8.根据权利要求1所述的一种苯硼酸-壳聚糖修饰的整体柱的制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述醇为甲醇和十二醇按体积比(2-3):17的混合物；所述引发剂为AIBN；所述苯硼酸功能化壳聚糖、所述甲基丙烯酸、所述乙二醇二甲基丙烯酸酯、所述醇、所述引发剂的质量比为6:(4-4.5):(20-25):(80-85):(0.3-0.5)。

9.一种根据权利要求1～8任一项所述的制备方法制得的苯硼酸-壳聚糖修饰的整体柱，其特征在于，所述整体柱的基体材料为聚(MAA-EGDMA)。

10.一种根据权利要求1～8任一项所述的制备方法制得的苯硼酸-壳聚糖修饰的整体柱在检测核苷中的应用。