[发明专利]一种利用土豆淀粉调节细菌纤维素膜孔径用于油水分离的制备方法

权利要求书

1.一种利用土豆淀粉调节细菌纤维素膜孔径用于油水分离的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)、配制细菌纤维素/淀粉膜培养基：

称取葡萄糖25g，酵母提取物7.5g，胰蛋白胨10g，磷酸氢二钠10g溶于950mL水中，搅拌溶解，用冰醋酸调节pH至6.0，定容到1L；然后，分别称取0.5g、1g、1.5g、2g、2.5g马铃薯淀粉到250mL的三角瓶中，将培养基分装到上述已经装有不同质量淀粉的三角瓶中，每个三角瓶中加100mL培养基，80℃的条件下预糊化20min，115℃，灭菌30min，得到淀粉含量分别为0.5％、1％、1.5％、2％、2.5％的培养基；

2)、0.9％生理盐水的配制：

氯化钠9g，加入一定量的MilliQ水，搅拌至溶解，然后用容量瓶定容至1L，121℃高压灭菌，储存备用；

3)、培养和纯化细菌纤维素/淀粉膜：

将甘油管保藏的保藏号为CGMCC No.2955的Gluconacetobacter xylinus以200μL/100mL涂布到固体培养基上，30℃培养3d，用接种环挑取皿中单菌落接种到液体培养基中，30℃、180rpm条件下培养24h后，8000rpm、5min条件下收集菌体，并用0.9％的生理盐水洗涤、重悬，将OD值调整至0.5，以6％的接种量接入到步骤1)所述培养基中发酵，30℃静置培养3d；培养2d后，培养基表面可看到有透明薄膜生成，随着培养时间的延长，膜的厚度逐渐增加；

培养结束后，收集膜，用蒸馏水冲洗，除去膜表面附着的菌体和培养基，再用1％的氢氧化钠煮沸2h后，用蒸馏水浸泡冲洗，直到其pH呈中性，得到细菌纤维素/淀粉膜；

4)、正硅酸乙酯/乙醇溶液的配制：量取10mL正硅酸乙酯溶液加体积百分含量75％乙醇至100mL，配置成10％的正硅酸乙酯/乙醇溶液；

5)、十六烷基三甲氧基硅烷/乙醇溶液的配制：量取3mL十六烷基三甲氧基硅烷溶液加体积百分含量95％乙醇至100mL，配置成3wt％的十六烷基三甲氧基硅烷/乙醇溶液；

6)、细菌纤维素/二氧化硅/十六烷基三甲氧基硅烷复合膜的制备：

(1)将产生的细菌纤维素/淀粉膜置于体积百分含量75％乙醇中，过夜浸泡，除去膜中的固有的水；

(2)将预处理的膜浸泡在10％的正硅酸乙酯/乙醇溶液中，150rpm，摇晃4h后，取出样品，用体积百分含量75％酒精冲洗；

(3)置于NH₃·H₂O/乙醇溶液中，150rpm，摇晃1h；

(4)置于乙醇中浸泡3h，再用去离子水浸泡过夜交换溶剂；将上述步骤得到的细菌纤维素/二氧化硅膜冷冻干燥24h；

(5)在50℃的条件下使用十六烷基三甲氧基硅烷/乙醇溶液浸泡3wt％浸泡上述细菌纤维素/二氧化硅膜2h，赋予其疏水性，将其命名为细菌纤维素/二氧化硅/十六烷基三甲氧基硅烷油水分离复合膜。