[发明专利]一种快速摘取东方鲀属幼鱼耳石的方法

说明书

本发明提供一种快速摘取东方鲀属幼鱼耳石的方法，所述方法首先将东方鲀属幼鱼的头部与身体分离，得到头部，然后剪掉整个下颌，得到上颌及脑部，再然后自咽部后方向头部吻段剪开至眼部后缘，掰开切口处，即可在显微镜下清晰观察到东方鲀属幼鱼的矢耳石、微耳石和星耳石，按照先摘取星耳石，再摘取矢耳石和微耳石的顺序完整的摘取三对耳石。本发明提供的方法操作简单，易于掌握，耗时短，能够准确、完好无损地将三对耳石全部取出，节省东方鲀属幼鱼耳石摘取的时间，缩短摘取周期，具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明属于生物样品制备技术领域，具体涉及一种快速摘取东方鲀属幼鱼耳石的方法。

背景技术

耳石是硬骨鱼类在成长过程中沉积在内耳膜迷路内的结石，对鱼类的平衡和听觉起着重要作用。耳石中的轮纹由于在形成过程中形态结构与化学组成相当稳定地记录了鱼类个体生活过程中丰富的生物-物理-化学环境信息，因此耳石为鱼类种间识别、群体划分、生态型识别、年龄估算等方面提供了参考。硬骨鱼类内耳的椭圆囊、球囊和听壶中分别具有微耳石(Lapilli)、矢耳石(Sagittae)和星耳石(Asteriscus)各1对。

近年来，利用耳石显微结构形态参数分析鱼类种群的异同，具有较好的效果。耳石还记录了鱼类早期生长发育阶段的生活史事件。利用激光剥蚀电感耦合等离子体质谱分析(LA-ICPMS)、电子微探针(EPMA)、同步辐射X射线荧光分析法(SYXRF)等技术测定分析耳石全区或某一区域中的微量元素，分析沉积于耳石中的微量元素，可以推断鱼类洄游、繁殖、产卵等生长发育过程中的环境特点，了解鱼类在整个生活史上历经的环境变化，能够有效反应鱼类生活水域的环境特点，为研究鱼类生长发育、生存环境(海水环境因子、食物营养等)及资源分布等研究提供基础数据，同时为研究鱼类的年龄与生长、洄游等提供重要基础信息，在鱼类生物学、资源评估研究中有重要参考价值。

在耳石的相关研究中，涉及到从鱼体头部摘取耳石。完整无损的耳石是耳石显微结构和元素分析的实验基础，因此快速完整的摘取耳石是制约实验成功和实验完成时间至关重要的因素之一。

目前耳石的摘取多采用解剖剪刀沿着鱼体脊椎骨方向，将鱼体头部脑盖骨剪开，取出脑组织，然后取出脑后下方的有机质和胶质，寻找耳石。CN105028281A的专利申请“一种纺锤形和侧扁形鱼类快速摘取矢耳石的方法”公开纺锤形和侧扁形鱼类耳石的摘取方法，具体公开步骤包括：将纺锤形鱼类鳃部翻开，用镊子将鱼内耳球状囊戳穿，取得矢耳石；侧扁形鱼类则将鱼眼斜上方的背部切开，从鱼内耳球状囊摘取矢耳石。

然而，目前所使用的方法，均不适合东方鲀属幼鱼耳石的摘取。首先，由于常规方法摘取耳石，脑部的有机质和胶质较多，易造成混淆，耳石摘取的过程复杂、费时。在星耳石和微耳石的摘取的过程中，耳石可能随着胶质移动，而丢失。其次，纺锤形鱼类耳石的摘取方法，能快速的摘取出矢耳石，但是寻找微耳石和星耳石比较困难。再次，东方鲀属鱼类鳃孔侧中位，短横月形，不易打开。最后，东方鲀属鱼类头部后半部似长方形，与侧扁形鱼类不同，若在眼斜上方背部开口，易造成东方鲀属幼鱼耳石的破裂，很难保证耳石的完整性。

发明内容

为了解决以上的技术问题，本发明提供一种操作简单，易于掌握，耗时短，能够快速完整的摘取出东方鲀属幼鱼三对耳石的方法。

本发明提供的快速摘取东方鲀属幼鱼耳石的方法，包括以下步骤：

(1)将东方鲀属幼鱼头部与身体分离，得到东方鲀属幼鱼头部；

(2)将东方鲀属幼鱼头部的上下颌剪开，弃下颌，得到东方鲀属幼鱼的上颌及脑部；

(3)将东方鲀属幼鱼上颌的鱼鳃去除，鱼头背部朝下，咽部朝上，沿脊椎骨自咽部后方向头部吻段剪开，得到处理好的东方鲀属幼鱼头部；

(4)将处理好的东方鲀属幼鱼头部放置于显微镜下，露出幼鱼脑部结构；