[发明专利]基于药物基因多态性及血栓弹力图的血小板治疗指导方法

权利要求书

1.基于药物基因多态性及血栓弹力图的血小板治疗指导方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、药物基因检测：通过PCR和Sanger法测序技术检测阿司匹林和氯吡格雷相关的基因多态性位点；

S2、全血基因组DNA测序：取静脉血2ml于EDTA抗凝管中，利用全血基因组DNA提取试剂盒来提取DNA，再将提取的DNA进行PCR扩增，最后将扩增产物使用测序仪进行测序；

S3、进行代谢型分类：根据基因型进行代谢型分类，分为强代谢型和弱代谢型；

S4、TEG检测：使用TEG5000型凝血分析仪对肘静脉血进行分析，2h内检测AA途径诱导的血小板抑制率(AA％)和ADP受体途径诱导的血小板抑制率(ADP％)；

S5、结果分析：AA抑制率＜50％，定义为AR；ADP抑制率＜30％，定义为CR。

2.根据权利要求1所述的基于药物基因多态性及血栓弹力图的血小板治疗指导方法，其特征在于，所述S1中，阿司匹林相关基因检测COX-1(AG)、ITGB3(TC)基因，其中G、C为阿司匹林抵抗相关等位基因；氯吡格雷相关基因检测CYP2C19基因*2(681G/A)、*3(636G/A)、*17(-806C/T)。

3.根据权利要求2所述的基于药物基因多态性及血栓弹力图的血小板治疗指导方法，其特征在于，所述S2中，DNA测序前经过酶切反应，酶切反应条件：变性：94℃，5min，94℃，30s；退火：56℃，20s；延伸：72℃，20s；

共35个循环，最后72℃延伸5min。

4.根据权利要求3所述的基于药物基因多态性及血栓弹力图的血小板治疗指导方法，其特征在于，功能缺失等位基因携带者为至少有1个功能缺失等位基因的患者：*1/*2、*1/*3、*2/*2、*2/*3、*3/*3、*2/*17或*3/*17；功能缺失等位基因非携带者为无功能缺失等位基因的患者：*1/*1，*1/*17，或*17/*17。

5.根据权利要求4所述的基于药物基因多态性及血栓弹力图的血小板治疗指导方法，其特征在于，所述S4中，根据CYP2C19*2、*3和*17基因型进行代谢型分类，分为强代谢型：野生型纯合子组CYP2C19*1/*1的快代谢型、CYP2C19*1/*17的超快代谢型；

弱代谢型：野生型与突变基因杂合子组：CYP2C19*1/*2和*1/*3的中间代谢型、突变基因纯合子或杂合子组：CYP2C19*2/*2、2/*3和*3/*3的慢代谢型。

6.根据权利要求1或5所述的基于药物基因多态性及血栓弹力图的血小板治疗指导方法，其特征在于，所述凝血分析试剂包括高岭土、激活剂、花生四烯酸和二磷酸腺苷。

7.根据权利要求6所述的基于药物基因多态性及血栓弹力图的血小板治疗指导方法，其特征在于，所有数据均采用SPSS17.0统计软件包进行处理。

8.根据权利要求7所述的基于药物基因多态性及血栓弹力图的血小板治疗指导方法，其特征在于，计量资料符合正态分布的采用均数±标准差表示，不符合正态分布的采用中位数，两组间均数比较采用独立样本t检验，计数资料用例数和百分率表示，组间比较采用χ²检验。

9.根据权利要求8所述的基于药物基因多态性及血栓弹力图的血小板治疗指导方法，其特征在于，所有检验均为双侧检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。