[发明专利]快速高效检测雪峰虫草不同菌株交配型的方法及引物组

权利要求书

1.一种引物组，其特征在于，包括雪峰虫草MAT1-1交配型引物组和雪峰虫草MAT1-2交配型引物组；雪峰虫草MAT1-1交配型引物组包括序列SEQ ID NO:1、序列SEQ ID NO:2、序列SEQ ID NO:3和序列SEQ ID NO:4；所述雪峰虫草MAT1-2交配型引物组包括序列SEQ ID NO:5、序列SEQ ID NO:6、序列SEQ ID NO:7和序列SEQ ID NO:8。

2.一种快速高效检测雪峰虫草不同菌株交配型的方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一、将待检测物和环介导等温扩增缓冲液与雪峰虫草MAT1-1交配型引物组或雪峰虫草MAT1-2交配型引物组混合，得到混合反应液；雪峰虫草MAT1-1交配型引物组包括序列SEQ ID NO:1、序列SEQ ID NO:2、序列SEQ ID NO:3和序列SEQ ID NO:4；所述雪峰虫草MAT1-2交配型引物组包括序列SEQ ID NO:5、序列SEQ ID NO:6、序列SEQ ID NO:7和序列SEQ ID NO:8；

步骤二、将混合反应液加热进行环介导等温扩增；

步骤三、根据混合反应液颜色得到待检测物是否为雪峰虫草MAT1-1交配型或雪峰虫草MAT1-2交配型。

3.如权利要求2所述的快速高效检测雪峰虫草不同菌株交配型的方法，其特征在于，所述步骤一中，混合反应液中包括10×BstBuffer 2体积份，100mM Mg₂SO₄ 1.6体积份，10mMdNTPs 2.8体积份，雪峰虫草MAT1-1交配型引物组或雪峰虫草MAT1-2交配型引物组Ox1F共1体积份；引物组中各引物摩尔量相同；8U/μlBst DNA polymerase 0.8-1.5体积份，3mM羟基萘酚蓝溶液0.8体积份，10-200ng/μL待检测物1体积份，然后加ddH₂O补足至20体积份。

4.如权利要求2所述的快速高效检测雪峰虫草不同菌株交配型的方法，其特征在于，所述步骤二中，加热温度为61-63℃，加热时间为0.75-1.5h。

5.如权利要求2所述的快速高效检测雪峰虫草不同菌株交配型的方法，其特征在于，所述待检测物为所需检测样本的DNA。