[发明专利]表面增强拉曼散射基底引入内标分子的方法

说明书

本申请公开了表面增强拉曼散射基底引入内标分子的方法及其制备的基底和应用，所述方法包括以下步骤：提供表面增强拉曼散射基底，滴加内标分子溶液在基底上，利用惰性气体吹干基底，获得内标分子标记的表面增强拉曼散射基底。本申请的方法操作简单，普适性强。本申请的方法制备的表面增强拉曼散射基底能够检测水体中孔雀石绿，具有很好的应用潜力。

技术领域

本申请涉及表面增强拉曼散射基底制备领域，特别是涉及表面拉曼增强拉曼散射基底引入内标分子的方法及其制备的基底和应用。

背景技术

表面增强拉曼散射(SERS)因其独特的分子指纹和无损检测能力已经成为一种广泛应用的分析技术，但是，由于SERS信号的再现性普遍不理想，制约了其在定量分析领域的应用。

采用内标法是提高SERS定量分析结果准确度的有效方法之一，常用的内标法主要有3种方式：(1)合成核壳结构的纳米粒子，将内标分子嵌入到核与壳之间；(2)构建具有拉曼信号的SERS基底；(3)将分析物与其同位素混合，以同位素的信号为内标信号。这些内标法都能克服测量条件和微环境等各种干扰的影响，实现SERS精确定量。但是，这些方法较为繁琐，普适性不强，不能大面积推广，而且监管过程往往需要精密仪器。

发明内容

本申请针对表面增强拉曼散射基底引入内标分子的操作繁琐，普适性不强等问题，提供了一种表面增强拉曼散射基底引入内标分子的方法。

表面增强拉曼散射基底引入内标分子的方法，包括以下步骤：提供表面增强拉曼散射基底，滴加内标分子溶液在基底上，利用惰性气体吹干基底表面，获得内标分子标记的表面增强拉曼散射基底。

可选的，所述表面增强拉曼散射基底的载体为硅片或氧化铝，金属纳米粒子附着在载体表面，金属纳米粒子可以是金、银或铜。

所述滴加是通过移液枪等工具滴加在具有载体金属纳米粒子所在的区域。

可选的，所述基底为Au NBPs coffee ring SERS基底、Au NPs/Si SERS芯片或AuNPs/Al₂O₃ SERS芯片。

其中，Au NBPs coffee ring SERS基底的制备方法：(1)0.5μL-1.0μL Au NBPs(1.0x 10^-9-1.0x 10^-8M)滴加于洁净干燥的硅片表面；(2)氮气吹干处理后，即可得到AuNBPs coffee ring SERS基底。

Au NPs/Si SERS芯片：来源于蔚海光学仪器(上海)有限公司。

Au NPs/Al₂O₃ SERS芯片：来源于深圳拓扑科技。

提供不同的基底验证引入内标分子的方法的普适性，其验证步骤如下：

(1)将4-巯基苯甲酸分别滴加到三种不同的表面增强拉曼散射基底上；

(2)经氮气吹干处理后，得到4-巯基苯甲酸标记的表面增强拉曼散射基底；

(3)将罗丹明6G分别滴加到4-巯基苯甲酸标记的基底以及在未标记的基底；

(4)经氮气吹干处理后，使用共聚焦显微拉曼仪进行检测。

可选的，所述内标分子溶液的溶剂为水。

可选的，所述内标分子带有巯基基团，且其Zeta电势与待测分子的相反。巯基基团具有吸附性，能够增强待测分子在金纳米基底上的吸附能力，从而提高拉曼信号强度。